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北京駱駝轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒使用要求

作者:北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司 2014-12-10T00:00 (訪問量:6455)

?北京駱駝轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒使用要求

注意事項(xiàng)

1.操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未

用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

3.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請(qǐng)避光保存。

6.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長檢測(cè)時(shí),參考波長為 630nm

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時(shí)必須注意安全。

操作步驟

1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1

孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先

加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不

觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

重復(fù) 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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