什么是MH培養(yǎng)基,MH培養(yǎng)基的原理是什么
MH培養(yǎng)基為MH瓊脂培養(yǎng)基,微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫,指的是水解酪蛋白。所以MH培養(yǎng)基也成為水解酪蛋白培養(yǎng)基。常用作培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子。
MH培養(yǎng)基的原理:
牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代謝產(chǎn)物。
MH培養(yǎng)基的成分:
酸水解酪蛋白/酸水解酪素 ? ? 17.5g
牛肉浸膏粉 ? ? ? ?2g
淀粉 ? ? ? 1.5g
瓊脂 ? ? ?12g
MH培養(yǎng)基的用法:
稱取本品21.0g,加熱溶解于1000ml?蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。
MH培養(yǎng)基的質(zhì)量控制:
質(zhì)量控制是用與常規(guī)實(shí)驗(yàn)相同的操作方法,測(cè)定質(zhì)控菌株的抑菌環(huán)。應(yīng)使用新鮮傳代菌種。接種菌液的涂布方法等均同常規(guī)操作,測(cè)定的抗菌素種類也應(yīng)與常規(guī)測(cè)定的種類相同。
MH培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)
MH培養(yǎng)基就是mh肉湯培養(yǎng)基,MH培養(yǎng)基指的就是水解酪蛋白(Mueller-Hinton)培養(yǎng)基,它是NCCLS美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)采用的需氧菌及兼性厭氧菌藥敏試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基,pH7.2~7.4,瓊脂厚度4mm。本文主要介紹的是MH培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)。
MH培養(yǎng)基的原理:
牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代謝產(chǎn)物;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
MH培養(yǎng)基的制備:
1、3.8gM-H瓊脂基礎(chǔ)+100mL蒸餾水
2、高壓滅菌(15磅、121℃)20min
3、冷卻至50℃傾倒平皿,厚度4mm
MH培養(yǎng)基注意事項(xiàng):
1、在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般不推薦使用CO2濃度比較高的環(huán)境中培養(yǎng),因?yàn)镃O2會(huì)影響培養(yǎng)基的PH值。
2、如果必須用CO2培養(yǎng),應(yīng)該包括測(cè)量CO2影響的測(cè)試平板。
3、糖類不應(yīng)作為MH瓊脂的添加物,因?yàn)樗麄儠?huì)影響細(xì)菌的生長(zhǎng)速率和培養(yǎng)基的PH值。
4、培養(yǎng)基中添加裂解馬血會(huì)進(jìn)一步減小胸腺密啶核苷的水平,可一直胸腺密啶核苷依賴的細(xì)菌的生長(zhǎng)。
MH培養(yǎng)基如何滅菌最合適以及MH培養(yǎng)基的使用方法
微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫,指的是水解酪蛋白。而MH培養(yǎng)基指的就是水解酪蛋白(Mueller-Hinton)培 養(yǎng)基,可配置成MH血瓊脂培養(yǎng)基用于鏈球菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)。本文主要介紹的是MH培養(yǎng)基如何滅菌最合適以及MH培養(yǎng)基的使用方法。
MH培養(yǎng)基如何滅菌
MH培養(yǎng)基可用濕熱滅菌法,115度30分鐘,作分離馴化蛋白酶的菌。
MH培養(yǎng)基的使用方法:
1、 稱取本品38g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用.
2、 試驗(yàn)菌液的制備:從TSA平皿上挑取3-5個(gè)形態(tài)相似的菌落頂端部分接種MHB或TSB培養(yǎng)基.經(jīng)36±1℃培養(yǎng)4-6小時(shí)后,比濁至0.5麥?zhǔn)蠁挝?
3、 接種:用無菌棉拭浸取比濁好的菌液,在管壁內(nèi)輕輕轉(zhuǎn)壓除去過多菌液,然后再輕輕涂抹培養(yǎng)基,每一平皿涂抹三次.每次涂抹后均需將平皿轉(zhuǎn)動(dòng)60度,再行下一次涂抹.每一質(zhì)控菌株涂抹三個(gè)平皿.
4、 貼片:接種后的平皿置室溫片刻,待稍干后,用無菌鑷子將抗生素紙片均勻貼布于平皿瓊脂表面.各紙片間中心間距不得小于24mm,紙片距平皿邊不得小于15mm.一旦紙片接觸瓊脂表面,即不可再移動(dòng),因此時(shí)藥物已開始擴(kuò)散.
5、 培養(yǎng):紙片貼妥后,在15-30分鐘內(nèi),將平皿翻過來置于36±1℃培養(yǎng)16—24h后,觀察結(jié)果.平皿培養(yǎng)時(shí)不宜堆放,以二個(gè)相疊為宜.
