WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IC, Immunocytochemistry.
H, human; M, mouse; R, rat; Mk, monkey; B, bovine; Ca, canine; Po, porcine.
本IRS1抗體(IRS1 antibody，即Insulin receptor substrate 1 antibody或IRS-1 antibody)為進(jìn)口分裝，用重組小鼠IRS1一段多肽(aa431-446)作為抗原制備而成的抗IRS1小鼠單克隆抗體。克隆號(hào)為4.2.2。
本IRS1抗體識(shí)別的是總IRS1(total IRS1)，可以檢測(cè)內(nèi)源性的IRS1，未發(fā)現(xiàn)和其它亞型如IRS2等有交叉反應(yīng)。
IRS1(insulin receptor substrate 1)，也稱IRS-1，是胰島素受體(insulin receptor)激酶的主要底物。IRS1含有多個(gè)酪氨酸磷酸化位點(diǎn)，這些位點(diǎn)磷酸化后可以結(jié)合含有SH2結(jié)構(gòu)域的蛋白，如PI3-K和GRB2等，從而介導(dǎo)胰島素誘導(dǎo)的代謝和促生長(zhǎng)信號(hào)。IRS1還含有30多個(gè)serine/threonine磷酸化位點(diǎn)。胰島素刺激可以誘導(dǎo)IRS1的Ser302磷酸化。JNK和IKK可以磷酸化IRS-1的Ser307；AMPK家族的SIK-2可以磷酸化IRS1的Ser789。PKC可以調(diào)節(jié)IRS1的Ser612位點(diǎn)磷酸化，而IRS1的Ser636/639位點(diǎn)磷酸化受mTOR信號(hào)通路調(diào)控。PKCτ介導(dǎo)IRS1的Ser1101位點(diǎn)磷酸化。IRS1一方面介導(dǎo)了胰島素的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，但I(xiàn)RS1過表達(dá)或一些絲氨酸磷酸化也會(huì)導(dǎo)致胰島素抵抗(insulin resistance)。
配套提供了Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測(cè)時(shí)的一抗稀釋。
建議抗體使用時(shí)的稀釋比例如下(實(shí)際使用時(shí)需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整)：
| WB | IP | IC |
| 1:500 | 1:50 | 1:250 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測(cè)，至少可以檢測(cè)20次。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| AI618-1 | IRS1抗體(小鼠單抗) | 40μl |
| AI618-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
IRS1抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長(zhǎng)期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項(xiàng)：
在Western實(shí)驗(yàn)后，請(qǐng)注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時(shí)至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，4℃保存。
回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測(cè)。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長(zhǎng)霉長(zhǎng)菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. Western檢測(cè)：
A. 按照1:500用Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動(dòng)過夜或室溫緩慢搖動(dòng)2小時(shí)，確保稀釋的抗體至少能在搖動(dòng)的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗，4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測(cè)等操作。具體操作可以參考如下網(wǎng)頁：
2. 免疫染色：
可以使用免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體，使用后注意回收稀釋好的一抗，具體操作可以聯(lián)系客服
3. 其它實(shí)驗(yàn)操作請(qǐng)自行參考適當(dāng)?shù)膒rotocol進(jìn)行。?