抗原競爭間接法
抗原競爭間接法與酶標(biāo)記抗原競爭法的不同點(diǎn)主要是不使用酶標(biāo)記抗原,而使用酶標(biāo)記抗體,用于抗原的測(cè)定。大致過程如下:首先將純化抗原吸附于載體表面形成抗原致敏載體,將抗原致敏載體用于兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)即參考系統(tǒng)和待測(cè)系統(tǒng)。在待測(cè)板中加入適量參考抗體與待測(cè)抗原的混合物,在平行的參考板中只加參考抗體。反應(yīng)后,參考板中的參考抗體與固相抗原充分結(jié)合,而待測(cè)板中由于待測(cè)抗原的競爭,參考抗體就不與或少固相抗原結(jié)合。通過洗滌去除游離抗原抗體復(fù)合物,留存固相抗原抗體復(fù)合物。然后在參考板和待測(cè)板中分別加入酶標(biāo)抗抗體,形成酶標(biāo)記的免疫復(fù)合物。最后加入底物產(chǎn)生有色物質(zhì)。由于參考板中結(jié)合的酶標(biāo)抗抗體量比待測(cè)板的多,因此反應(yīng)色深,參考板與待測(cè)板的色差就表示待測(cè)抗原的量。抗原競爭間接法由于測(cè)定過程過程復(fù)雜,因此在實(shí)際使用中較少。
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