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一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
1. 產(chǎn)品名稱:豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞
2. 組織來(lái)源:脂肪組織
3. 產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4. 細(xì)胞簡(jiǎn)介:
豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞?構(gòu)成,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需?要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島?素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理?過(guò)程;脂肪組織已由過(guò)去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌?系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細(xì)胞群,具有自我更新能力和多向分化潛能,被?稱為脂肪組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞,簡(jiǎn)稱脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞。與骨髓間充質(zhì)干細(xì)?胞相比,在來(lái)源、細(xì)胞群特點(diǎn)以及分化潛能等多方面極為相似。但是,脂肪間充?質(zhì)干細(xì)胞更易獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞,且獲取過(guò)程中對(duì)機(jī)體損傷更小,是更為理想?的自體干細(xì)胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞以梭形為主要形態(tài),BrdU?可標(biāo)記其細(xì)胞核。
本公司生產(chǎn)的豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約?為5×105cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%?以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5. 培養(yǎng)基信息:
DMEM-F12、FBS、間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Glutamine、Penicillin、?Streptomycin等
我們推薦使用我公司豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞專用完全培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-P002)作
為體外培養(yǎng)豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)基。
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二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài) 發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
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三、使用方法
在我公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞可傳8代左右,隨著傳代次?數(shù)的增加,細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)老化狀態(tài),生長(zhǎng)速度減緩,5代以內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)最佳;建議您收到 細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽?和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培?養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待?細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全?培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
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四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和?我公司技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)?和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)?題得到解決。
5. 該細(xì)胞只可用于科研。
備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考
