卡梅德生物(KMDTM Bioscience)多年來致力于酵母雙雜交系統(Yeast two-hybrid system，Y2H)的研究。我們的酵母雜交系統是由基于SMART法構建的文庫、酵母菌株、嚴謹的報告基因、高表達載體組成的。這項技術可用于：研究蛋白的相互作用;確認蛋白的交互作用;定義蛋白的交互域。

　　酵母雙雜交系統是一種體內方法，用于鑒定編碼蛋白質與目標蛋白質相互作用的新基因技術。該系統為識別相互作用的蛋白質提供了多項創新，雙雜交系統是第一個檢測相互作用蛋白的遺傳和分子方法，該檢測是在體內進行的，這樣可以檢測天然結構中的相互作用蛋白。因此，雙雜交系統在檢測微弱和瞬時蛋白質相互作用方面具有無與倫比的靈敏度。此外，雙雜交系統能夠簡捷地得到編碼相互作用蛋白的基因序列，它只需構建質粒而不必準備抗體或純化蛋白，無需其它體外檢測蛋白之間相互作用方法所必須的蛋白抽提、純化等繁瑣步驟。雙雜交系統可用于篩選文庫中編碼與已知靶蛋白相互作用的蛋白質的基因，或測試已知蛋白質的相互作用。

　　卡梅德生物科技研究室對酵母雙雜交系統(Y2H)原理的介紹：

　　傳統Y2H檢測的原理是利用報告基因，其激活依賴于特定的轉錄因子。具體而言，待測蛋白質X和Y分別與 DNA 結合域 (BD) 和轉錄因子的激活域 (AD) 融合。BD-X 融合蛋白與報告基因啟動子的上游激活子序列 (UAS) 結合。在X和Y之間相互作用時，AD將被募集到啟動子，并重建功能性轉錄因子，從而觸發報告基因的后續轉錄(圖1)

　　作為一種基因技術，酵母雙雜交篩選提供了一種敏感且經濟的方法來測試兩個目標蛋白之間的直接相互作用，或使用蛋白質作為誘餌來篩選從所需的細胞類型、組織或整個生物體制備的蛋白質片段庫。通過測序所選酵母菌菌落中相應的質粒，確定相互作用。

　　實驗步驟：

　　①創建BD-X誘餌

　?、谕ㄟ^BD-X誘餌測試自我激活

　　③執行酵母雙雜交篩選和識別獵物

　　Y2H檢測服務：

　　為了研究大量蛋白質的相互作用，科學家根據Y2H系統，開發了幾種系統以適應不同蛋白質的不同亞細胞定位和生化特征。KMD Bioscience為客戶提供多種系統的服務，以適應不同項目的不同需求。

　　● 酵母單雜交系統：研究蛋白質-DNA下相互作用

　　● 酵母三雜交系統：研究第三成分介導的蛋白質的相互作用

　　● 分裂泛素Y2H系統：用于研究膜蛋白

　　卡梅德生物科技服務范圍：

　　我們提供一站式服務：從構建文庫到陽性克隆的篩選，這樣可提高效率，避免錯誤，從而為客戶從客觀上節省費用。

　　服務內容：

　　1、將誘餌靶基因連接到Y2H載體中去，并測序。誘餌靶基因可以是一段基因(酶切)或全長基因

　　2、測試誘餌基因的自我激活能力和毒性。

　　3、文庫篩選和交互驗證。

　　4、陽性克隆的分離提取和DNA的測序。

　　客戶提供：

　　--不少于2? 的質粒(含誘餌靶基因)

　　--該基因的DNA序列，以便我們設計合成方案，進行人工合成(需收費)

　　交付內容：

　　--陽性克隆若干及DNA測序結果

　　--每個陽性克隆不少于2? 質粒

　　實驗周期：約6-8周

　　卡梅德生物科技服務優勢：

　　1、技術專家直接服務，滿足不同檢測需要;

　　2、高準確度分析儀器，經驗豐富的操作以及嚴格的質量管理，保證結果精準可靠;

　　3、檢測效率高，檢測過程實時監控;

　　4、儀器檢測靈敏度更高，樣品消耗量更低;

　　5、實驗周期更短，節省客戶的等待時間;

　　6、提供真正的一站式服務：從構建文庫到陽性克隆的篩選，這樣可提高效率，避免錯誤，從而為客戶從客觀上節省費用

　　服務流程

　　如果您對我們的服務項目感興趣，請直接撥打熱線電話：+86-022-8216-4980/156-0119-0182

　　發送郵件至info@kmdbioscience.com