科室講座&丁香通公開課精彩回顧
我公司技術(shù)支持嚴(yán)君受丁香通邀請于今天下午14:30分聯(lián)合丁香通開展了一堂在線公開課——原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。
內(nèi)容摘要:
(1)原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)原理介紹
(2)原代細(xì)胞培養(yǎng)實驗步驟重難點講解
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)實例剖析
公開課的提問環(huán)節(jié)非常火爆,在此我們也整理了一些問題供大家參考。
1神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)三四天后聚集成球后不再明顯的增殖是什么原因?
有可能是換液不及時或者是加入的細(xì)胞因子劑量不對。
2神經(jīng)干細(xì)胞在完全成球前可以換液嗎?
可以換液,此細(xì)胞相對好養(yǎng)。
3取肝原代活細(xì)胞的活小鼠太小(7-8周)會不會有影響?
年齡越小分離的細(xì)胞活性會越好。
4.懸浮培養(yǎng)細(xì)胞早期半換液細(xì)胞流失太嚴(yán)重,可是如果采用離心,是否會對剛形成的神經(jīng)球有很大的損傷?
離心之后棄上清加PBS重懸再離心,然后棄上清加培養(yǎng)液重懸,這樣操作會好些。
5.怎么做pcr驗證?
支原體的驗證有很多成熟的商業(yè)化試劑盒,如果實驗過程中多次出現(xiàn)懷疑支原體污染,可以買試劑盒檢測。
6.如何從小鼠肺轉(zhuǎn)移灶中分離出腫瘤細(xì)胞,及后續(xù)如何鑒定培養(yǎng)的細(xì)胞是所需的腫瘤細(xì)胞?
分離操作很簡單,將病變組織取出,然后研磨收集細(xì)胞培養(yǎng)就可以了,研磨時力度要小;鑒定就需要查找一些針對性的標(biāo)志物,進行流式或者組化鑒定。
7.淋巴團出現(xiàn)團塊是什么問題?
一般是由于細(xì)胞狀態(tài)不好,或是使用的血清、培養(yǎng)基不適合淋巴細(xì)胞的生長,細(xì)胞狀態(tài)不好就會聚集成團。
8.關(guān)于黑膠蟲?
如出現(xiàn),檢查培養(yǎng)箱及血清被污染的原因,大范圍排除出污染的原因,將以前的細(xì)胞扔掉,徹底打掃實驗室。
9原代細(xì)胞容易老化?
原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中老化是很正常的情況,盡量取前面幾代細(xì)胞進行實驗再次分離。
本周二晚上7:00,我們的科室講座在重慶市新橋醫(yī)院神內(nèi)科開展。為大家?guī)砹司实?/font>ChIP染色質(zhì)免疫共沉淀實驗分享。


威斯騰生物致力于生命科學(xué)研究、產(chǎn)品開發(fā)和技術(shù)服務(wù)。在為廣大的科研工作者提供專業(yè)服務(wù)的同時,更為了加強學(xué)術(shù)交流,推動科研發(fā)展,開展各種學(xué)術(shù)會議、講座,為廣大科研工作者提供技術(shù)支持。
從科室講座到在線公開課,我們一直在努力,讓大家感受威斯騰的魅力!
走進科室系列講座十一場——CRISPR/Cas9技術(shù)應(yīng)用與發(fā)展預(yù)告
主講人:申友鋒

高級工程師,CRISPR/Cas9項目組負(fù)責(zé)人,致力于基因靶向操作技術(shù)研究,參與國家重大科研項目“973”項目(轉(zhuǎn)基因動物疾病模型研究),先后利用Talen技術(shù)成功敲除豬p53基因和敲除p53基因同時過表達(dá)H-ras+c-myc基因,成功構(gòu)建出豬的腫瘤模型。加入威斯騰后,組建成立CRISPR/Cas9團隊并擔(dān)任負(fù)責(zé)人,利用CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)構(gòu)建細(xì)胞、小鼠疾病模型及人類疾病治療方面應(yīng)用。
講座內(nèi)容摘要
(1)基因編輯技術(shù)簡介
(2)構(gòu)建細(xì)胞、動物模型應(yīng)用
(3)新基因編輯工具Cpf1及Cas9比較
時間:2016年10月24日下午16:00——17:00
地點:重慶市新橋醫(yī)院主病房7樓神經(jīng)外科學(xué)習(xí)室
