科室講座&丁香通公開課精彩回顧

我公司技術支持嚴君受丁香通邀請于今天下午14:30分聯合丁香通開展了一堂在線公開課——原代細胞培養技術。

內容摘要：

（1）原代細胞培養技術原理介紹

（2）原代細胞培養實驗步驟重難點講解

（3）原代細胞培養實例剖析

公開課的提問環節非?；鸨?，在此我們也整理了一些問題供大家參考。

1神經干細胞在培養三四天后聚集成球后不再明顯的增殖是什么原因？

有可能是換液不及時或者是加入的細胞因子劑量不對。

2神經干細胞在完全成球前可以換液嗎？

可以換液，此細胞相對好養。

3取肝原代活細胞的活小鼠太小（7-8周）會不會有影響？

年齡越小分離的細胞活性會越好。

4.懸浮培養細胞早期半換液細胞流失太嚴重，可是如果采用離心，是否會對剛形成的神經球有很大的損傷？

離心之后棄上清加PBS重懸再離心，然后棄上清加培養液重懸，這樣操作會好些。

5.怎么做pcr驗證？

支原體的驗證有很多成熟的商業化試劑盒，如果實驗過程中多次出現懷疑支原體污染，可以買試劑盒檢測。

6.如何從小鼠肺轉移灶中分離出腫瘤細胞，及后續如何鑒定培養的細胞是所需的腫瘤細胞？

分離操作很簡單，將病變組織取出，然后研磨收集細胞培養就可以了，研磨時力度要??；鑒定就需要查找一些針對性的標志物，進行流式或者組化鑒定。

7.淋巴團出現團塊是什么問題？

一般是由于細胞狀態不好，或是使用的血清、培養基不適合淋巴細胞的生長，細胞狀態不好就會聚集成團。

8.關于黑膠蟲？

如出現，檢查培養箱及血清被污染的原因，大范圍排除出污染的原因，將以前的細胞扔掉，徹底打掃實驗室。

9原代細胞容易老化？

原代細胞培養過程中老化是很正常的情況，盡量取前面幾代細胞進行實驗再次分離。

本周二晚上7:00，我們的科室講座在重慶市新橋醫院神內科開展。為大家帶來了精彩的ChIP染色質免疫共沉淀實驗分享。

威斯騰生物致力于生命科學研究、產品開發和技術服務。在為廣大的科研工作者提供專業服務的同時，更為了加強學術交流，推動科研發展，開展各種學術會議、講座，為廣大科研工作者提供技術支持。

從科室講座到在線公開課，我們一直在努力，讓大家感受威斯騰的魅力！

走進科室系列講座十一場——CRISPR/Cas9技術應用與發展預告

主講人：申友鋒

高級工程師，CRISPR/Cas9項目組負責人，致力于基因靶向操作技術研究，參與國家重大科研項目“973”項目（轉基因動物疾病模型研究），先后利用Talen技術成功敲除豬p53基因和敲除p53基因同時過表達H-ras+c-myc基因，成功構建出豬的腫瘤模型。加入威斯騰后，組建成立CRISPR/Cas9團隊并擔任負責人，利用CRISPR/Cas9基因敲除技術構建細胞、小鼠疾病模型及人類疾病治療方面應用。

講座內容摘要

（1）基因編輯技術簡介

（2）構建細胞、動物模型應用

（3）新基因編輯工具Cpf1及Cas9比較

時間：2016年10月24日下午16：00——17:00

地點：重慶市新橋醫院主病房7樓神經外科學習室