TL-2010S自動研磨儀DNA提取適用性評估-技術前沿-資訊-生物在線

TL-2010S自動研磨儀DNA提取適用性評估

作者:北京鼎昊源科技有限公司 2013-10-18T10:10 (訪問量:8150)

TL-2010S自動研磨儀DNA提取適用性評估

TL-2010S自動研磨儀推出至今,越來越多用戶體驗了其在組織DNA提取中相對于手工研磨的方便性及高效性,近日我們在北京某診斷試劑生產企業研發實驗室做了一組樣品對比實驗。

實驗目的

對比TL2010S中通量自動研磨儀與手工液氮法研磨后的新鮮組織樣本在 DNA提取、RNA 提取性能方面的差異,評估自動研磨儀的適用性。

實驗材料及試劑

1. 實驗材料: 將 10 FT 樣本分別用吸水紙吸干表面的水分后,稱重后分裝為2 /例,20 mg±0.3 mg/管。

2. 實驗試劑: 天根DP422 DNA/ RNA共提試劑盒

實驗過程

1. 研磨

【自動研磨】向離心管內加入 300 μl 裂解液。將離心管放于液氮中,冷凍處理。

液氮冷凍處理后的離心管固定于自動研磨儀適配器中,向離心管中加入 2 3

mm 磁珠。小心將適配器正確安裝至自動研磨儀上,設置研磨參數: 5 輪循環數,60 s/輪,10 s 間隔。啟動儀器,研磨組織。研磨后,再向離心管中加入 300 μl 裂解液(裂解液總使用量為 600 μl) 。

【手工研磨】 取樣本放于研缽中,加入液氮后迅速研磨。將組織粉末轉移至離心管中,稱重后向其中加入 600 μl 裂解液。

2. 核酸提取、檢測及保存

將上述分別使用兩種研磨方法處理后的樣本,使用 DNA RNA 共提試劑盒同

時提取 DNA RNA。使用微量分光光度計測定 DNA、 RNA 的濃度及純度。 DNA提取后于-20℃保存,RNA -80℃保存。

實驗結果

實驗結論

自動研磨儀處理與手工液氮研磨處理后提取 FT DNA、RNA 在濃度、純度上均無顯著性差異(成對檢驗 P>0.05) 。但手工研磨有較大的樣本損失率,對于DNA提取濃度較低的樣品來說,自動研磨儀可以做到樣品0損失,在DNA提取上有著明顯的優勢,且手工處理的過程復雜、易交叉污染,操作所用時間等方面均不及TL2010S自動研磨儀,因此自動研磨儀對于DNA提取工作相對于手工研磨處理有很大優勢。

本文關鍵詞:自動研磨儀,研磨儀,DNA提取

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