TL-2010S自動研磨儀推出至今，越來越多用戶體驗了其在組織DNA提取中相對于手工研磨的方便性及高效性，近日我們在北京某診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)研發(fā)實驗室做了一組樣品對比實驗。
實驗目的
對比TL2010S中通量自動研磨儀與手工液氮法研磨后的新鮮組織樣本在 DNA提取、RNA 提取性能方面的差異，評估自動研磨儀的適用性。
實驗材料及試劑
1. 實驗材料： 將 10 例 FT 樣本分別用吸水紙吸干表面的水分后，稱重后分裝為2 管/例，20 mg±0.3 mg/管。
2. 實驗試劑： 天根DP422 DNA/ RNA共提試劑盒
實驗過程
1. 研磨
【自動研磨】向離心管內加入 300 μl 裂解液。將離心管放于液氮中，冷凍處理。
液氮冷凍處理后的離心管固定于自動研磨儀適配器中，向離心管中加入 2 粒 3
mm 磁珠。小心將適配器正確安裝至自動研磨儀上，設置研磨參數(shù)： 5 輪循環(huán)數(shù)，60 s/輪，10 s 間隔。啟動儀器，研磨組織。研磨后，再向離心管中加入 300 μl 裂解液（裂解液總使用量為 600 μl） 。
【手工研磨】 取樣本放于研缽中，加入液氮后迅速研磨。將組織粉末轉移至離心管中，稱重后向其中加入 600 μl 裂解液。
2. 核酸提取、檢測及保存
將上述分別使用兩種研磨方法處理后的樣本，使用 DNA RNA 共提試劑盒同
時提取 DNA 和 RNA。使用微量分光光度計測定 DNA、 RNA 的濃度及純度。 DNA提取后于-20℃保存，RNA 于-80℃保存。
實驗結果
實驗結論
自動研磨儀處理與手工液氮研磨處理后提取 FT 的 DNA、RNA 在濃度、純度上均無顯著性差異（成對檢驗 P>0.05） 。但手工研磨有較大的樣本損失率，對于DNA提取濃度較低的樣品來說，自動研磨儀可以做到樣品0損失，在DNA提取上有著明顯的優(yōu)勢，且手工處理的過程復雜、易交叉污染，操作所用時間等方面均不及TL2010S自動研磨儀，因此自動研磨儀對于DNA提取工作相對于手工研磨處理有很大優(yōu)勢。
本文關鍵詞：自動研磨儀，研磨儀，DNA提取
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