Lambda Protein Phosphatase (重組λ蛋白磷酸酶)，即λ Protein Phosphatase，是一種錳離子(Mn2+)依賴的重組表達純化的磷酸蛋白酶，可以對磷酸化的絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和組氨酸殘基進行脫磷酸反應。

本產品是大腸桿菌重組表達的帶6×His標簽的重組λ磷酸酶。該磷酸酶由λ噬菌體開放閱讀框ORF221所編碼，編碼產物共包含221個氨基酸殘基。

Lambda Protein Phosphatase可以用于蛋白的去磷酸化，從而可以用于研究蛋白磷酸化與其活性和結構的關系，以及驗證蛋白磷酸化位點抗體的特異性等。

酶活性單位定義：在30℃ pH7.5條件下反應1分鐘，能夠水解1nmol p-nitrophenyl phosphate所需的酶量定義為一個活性單位。

Lambda Protein Phosphatase酶活性鑒定結果參考圖1。

圖1. Lambda Protein Phosphatase酶活測定實驗圖。左圖：pNP標準曲線。右圖：Lambda Protein Phosphatase按照30、40、50、80、100、200、500倍稀釋后，在50μl反應體系中的酶量分別為0.27μg、0.20μg、0.16μg、0.10μg、0.08μg、0.04μg、0.016μg，并與100mM pNPP在1×Lambda Protein Phosphatase Buffer和1×MnCl2中在30℃反應5min后，加入12.5μl 3M NaOH終止反應，測定產生的pNP在405nm吸光度，并根據pNP標準曲線，計算Lambda Protein Phosphatase酶活性。不同批次檢測出來的酶活性會略有差別。

酶分子量大?。杭s26kDa。

純度：純度大于95%。

Lambda Protein Phosphatase存儲液組成為：50mM This-HCl (pH7.5)，100mM NaCl，0.1mM MnCl2，0.1mM EGTA，2mM dithiothreitol (DTT)，0.01%Brij35，50%(v/v)甘油。

10× Lambda Protein Phosphatase Buffer組成為：500mM Hepes (pH7.5)，100mM NaCl，20mM DTT，0.1% Brij35。

10× MnCl2組成為：10mM MnCl2。

失活：在50mM EDTA存在的條件下，65℃加熱1小時可使Lambda Protein Phosphatase失活。

包裝清單：

保存條件：

-20℃保存，一年有效。如果希望保存更長時間，可以適當分裝后-80℃凍存。

注意事項：

反復凍融會導致Lambda Protein Phosphatase酶活性降低。如果希望在-80℃凍存，建議適當分裝后保存，以方便后續使用。在-20℃存放時不會結凍，但在-80℃凍存時會結凍。

10mM釩離子(vanadate ions)能抑制Lambda Protein Phosphatase活性約90%，50mM EDTA可以抑制Lambda Protein Phosphatase活性約95%，1% Triton X-100、0.4% Nonidet P-40、0.025% Tween 20、0.5M NaCl、0.1mM ATP、10μg/ml pepstatin A、10μg/ml leupeptin, 10μg/ml aprotinin, 0.5mM PMSF、1mM benzamidine不影響Lambda Protein Phosphatase的酶活性。

需要注意的是不同蛋白脫磷酸化反應的速率是不同的，該酶的最佳反應溫度是30℃。某些樣品的粗提液用該酶進行去磷酸化處理時，請注意用盡可能短的時間進行處理，同時添加適量蛋白酶抑制劑(P1005、P1010、ST505或ST506等)以減少目的蛋白的降解。

本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明：
1.Lambda Protein Phosphatase對不同蛋白的脫磷酸化反應有不同活性，所以在實際應用中，我們建議對酶濃度和反應時間進行優化。反應體系中，反應緩沖液為1× Lambda Protein Phosphatase Buffer并且同時加入1× MnCl2 (最終濃度為1mM)。
2.以一般的去磷酸化反應為例：在50μl反應體系中，100U的Lambda Protein Phosphatase在30分鐘內可以除去相當于5μM的磷酸化的蛋白(單磷酸化)中約100%的磷酸。?