T細(xì)胞具有多種生物學(xué)功能，如直接殺傷靶細(xì)胞，輔助或抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，是人體內(nèi)為抵御疾病感染、腫瘤而形成的 “戰(zhàn)士” 。T淋巴細(xì)胞在適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中發(fā)揮核心作用，產(chǎn)生多種細(xì)胞因子的多功能T細(xì)胞被認(rèn)為是最有效的抗腫瘤效應(yīng)T細(xì)胞。
隨著免疫腫瘤學(xué)作為多種癌癥治療手段的出現(xiàn)，了解多功能T細(xì)胞分化和功能的潛在機(jī)制對(duì)于開發(fā)有效的治療方法至關(guān)重要。想要在異質(zhì)樣本中找到多功能T細(xì)胞，科學(xué)家必須能夠在單細(xì)胞水平上表征細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞毒性。常規(guī)的針對(duì)免疫細(xì)胞進(jìn)行功能分析的手段包括ELISA、Elispot、流式細(xì)胞儀、微流控多重因子分析、活細(xì)胞成像以及單細(xì)胞測(cè)序等。然而，大多數(shù)在單細(xì)胞水平上分析T細(xì)胞細(xì)胞因子分泌的現(xiàn)有方法都是破壞性的，因?yàn)榛罴?xì)胞在分析之后無法被回收，阻礙了將細(xì)胞因子分泌與其他功能參數(shù)（如細(xì)胞毒性和基因表達(dá)）相關(guān)聯(lián)的研究。
基于單細(xì)胞功能表征平臺(tái)Beacon?的Opto? T 細(xì)胞工作流程使全面分析單個(gè)T細(xì)胞并將此表型和功能數(shù)據(jù)與這些相同細(xì)胞的基因型相關(guān)聯(lián)變成可能。
單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)——多功能性和細(xì)胞毒性
使用多重細(xì)胞因子檢測(cè)（圖1）研究 T 細(xì)胞與抗原呈遞細(xì)胞 (APCs) 相互作用時(shí)細(xì)胞因子的分泌。可使用多種預(yù)先與捕獲分子和細(xì)胞表面標(biāo)記物結(jié)合的微珠來定制多達(dá)三種細(xì)胞因子組合的實(shí)驗(yàn)。
腫瘤殺傷力可視化
細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)利用抗原呈遞細(xì)胞（APCs）中caspase-3激活過程，將T細(xì)胞樣本中的不同殺傷（圖2和圖3）可視化，以便您可以輕松捕獲緩慢和快速的 APC 殺傷。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)可與多重細(xì)胞因子實(shí)驗(yàn)結(jié)合使用，可將殺傷能力與細(xì)胞因子分泌直接相關(guān)聯(lián)。
將表型與基因表達(dá)相關(guān)聯(lián)
回收感興趣的活細(xì)胞并將獨(dú)特的行為直接與基因型或基因表達(dá)聯(lián)系起來。TCRseq Well Plate試劑盒允許您擴(kuò)增 TCR α 和 β 鏈，并為下一代測(cè)序做好準(zhǔn)備（圖4A）。或者使用 OptoSeq Single Cell 3’mRNA 試劑盒對(duì)cDNA 進(jìn)行擴(kuò)增和測(cè)序并分析差異基因表達(dá)譜（圖4B）。OptoSeq Single Cell 3’mRNA 試劑盒捕獲所有mRNA，因此與細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)不兼容。
將珍貴樣品功能表征最大化
Beacon?平臺(tái)的技術(shù)核心是 OptoSelect? 芯片，其中包含數(shù)千個(gè)NanoPen? 小室。使用光電定位 (OEP)（圖5）將單個(gè)T細(xì)胞分類和分離或加載到NanoPen?小室中。加載后，可以對(duì)單個(gè)T細(xì)胞進(jìn)行多種分析。然后使用軟件直觀地進(jìn)行分析以選擇感興趣的表型，并指導(dǎo)下游檢測(cè)活細(xì)胞的回收。
圖5：每個(gè) OptoSelect? 芯片包含數(shù)千個(gè)NanoPen?小室。 OEP? 用于將細(xì)胞加載到 OptoSelect? 芯片上，隨后進(jìn)行單T細(xì)胞分析和回收以用于下游檢測(cè)。
尋找最佳T細(xì)胞的一站式平臺(tái)
使用相同細(xì)胞進(jìn)行多種檢測(cè)的能力使人們能夠更好地了解潛在地生物學(xué)信息。在各種平臺(tái)上單獨(dú)進(jìn)行的傳統(tǒng)檢測(cè)很難理解因果關(guān)系以及驅(qū)動(dòng)T細(xì)胞活動(dòng)的因素。
Opto? T 細(xì)胞功能表征工作流程讓您可以直接將單細(xì)胞表型和功能與基因表達(dá)聯(lián)系起來。
這種將表型與基因表達(dá)直接聯(lián)系起來的獨(dú)特能力為T細(xì)胞生物學(xué)、免疫反應(yīng)以及如何設(shè)計(jì)強(qiáng)大的T細(xì)胞療法提供了新的洞見。
欲了解Opto? T細(xì)胞功能表征工作流程詳細(xì)信息，請(qǐng)您關(guān)注“Berkeley Lights”微信公眾號(hào)回復(fù)“T細(xì)胞”獲取完整產(chǎn)品手冊(cè)。
關(guān)于PhenomeX
PhenomeX（NASDAQ: CELL）致力于助力科學(xué)家充分探索每個(gè)細(xì)胞的潛能，推動(dòng)功能細(xì)胞生物學(xué)邁向新紀(jì)元，以促進(jìn)人類健康發(fā)展。我們?yōu)榭茖W(xué)家提供揭示細(xì)胞功能的完整見解，使其全面了解每個(gè)細(xì)胞的深度功能表征。我們經(jīng)過驗(yàn)證的獨(dú)特高通量工具和服務(wù)提供了無與倫比的解決方案，加速了多功能細(xì)胞研究發(fā)展，成為改善疾病預(yù)防和治療的關(guān)鍵。我們屢獲殊榮的平臺(tái)已獲得全球各地研究人員的高度認(rèn)可，包括全球前15家制藥公司的研究人員，以及約85%的美國(guó)**綜合性癌癥中心的科研人員。
PhenomeX家族的單細(xì)胞功能表征平臺(tái)（原Berkeley Lights）Beacon?基于其特有的光電定位技術(shù) (OptoElectro Positioning, OEP?) 為廣大科學(xué)家提供了先進(jìn)的研究手段，對(duì)數(shù)以萬計(jì)單細(xì)胞的基因信息、功能等進(jìn)行深入表征，以篩選出滿足用戶需求的目的細(xì)胞。Beacon?應(yīng)用場(chǎng)景涵蓋抗體發(fā)現(xiàn)、細(xì)胞株開發(fā)、傳染病研究、免疫學(xué)研究、腫瘤生物學(xué)研究、細(xì)胞療法開發(fā)、基因編輯、農(nóng)業(yè)科學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域，為從事尖端的科研項(xiàng)目及加速企業(yè)生物產(chǎn)品的開發(fā)提供了前所未有的機(jī)遇。
PhenomeX家族的單細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)平臺(tái)（原IsoPlexis）是單細(xì)胞多組學(xué)不可或缺的重要組成部分，在臨床科研領(lǐng)域，針對(duì)評(píng)估和檢測(cè)人體單細(xì)胞免疫能力、篩選癌癥治療方案、預(yù)測(cè)評(píng)估臨床療效及安全性等方面有著豐富的成功經(jīng)驗(yàn)，為預(yù)測(cè)病人長(zhǎng)期生存、早期篩選治療獲益患者提供了詳實(shí)的參考數(shù)據(jù)，幫助世界各地的科研人員在腫瘤免疫、細(xì)胞治療、腫瘤學(xué)、抗感染免疫研究及疫苗開發(fā)、自身免疫病、移植免疫等方向取得了眾多突破性成果，助力加速臨床科研、醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)行業(yè)發(fā)展。
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IsoPlexis和Berkeley Lights已合并成立新公司PhenomeX