PhenomeX單細胞功能表征平臺Beacon®新增T細胞工作流程-自主發布-資訊-生物在線

PhenomeX單細胞功能表征平臺Beacon®新增T細胞工作流程

作者:IsoPlexis 2023-04-28T09:49 (訪問量:14484)

T細胞具有多種生物學功能,如直接殺傷靶細胞,輔助或抑制B細胞產生抗體,是人體內為抵御疾病感染、腫瘤而形成的 “戰士” 。T淋巴細胞在適應性免疫系統中發揮核心作用,產生多種細胞因子的多功能T細胞被認為是最有效的抗腫瘤效應T細胞。

隨著免疫腫瘤學作為多種癌癥治療手段的出現,了解多功能T細胞分化和功能的潛在機制對于開發有效的治療方法至關重要。想要在異質樣本中找到多功能T細胞,科學家必須能夠在單細胞水平上表征細胞因子分泌和細胞毒性。常規的針對免疫細胞進行功能分析的手段包括ELISA、Elispot、流式細胞儀、微流控多重因子分析、活細胞成像以及單細胞測序等。然而,大多數在單細胞水平上分析T細胞細胞因子分泌的現有方法都是破壞性的,因為活細胞在分析之后無法被回收,阻礙了將細胞因子分泌與其他功能參數(如細胞毒性和基因表達)相關聯的研究。

基于單細胞功能表征平臺Beacon?的Opto? T 細胞工作流程使全面分析單個T細胞并將此表型和功能數據與這些相同細胞的基因型相關聯變成可能

單細胞實驗——多功能性和細胞毒性

使用多重細胞因子檢測(圖1)研究 T 細胞與抗原呈遞細胞 (APCs) 相互作用時細胞因子的分泌??墒褂枚喾N預先與捕獲分子和細胞表面標記物結合的微珠來定制多達三種細胞因子組合的實驗。

圖1: 刺激后,從單個T細胞同時測量最多三種細胞因子的分泌。

腫瘤殺傷力可視化

細胞毒性實驗利用抗原呈遞細胞(APCs)中caspase-3激活過程,將T細胞樣本中的不同殺傷(圖2和圖3)可視化,以便您可以輕松捕獲緩慢和快速的 APC 殺傷。細胞毒性實驗可與多重細胞因子實驗結合使用,可將殺傷能力與細胞因子分泌直接相關聯。

圖2: 測定 T 細胞殺傷能力的實驗設置。

圖3: 通過芯片(on-chip)上的熒光成像呈現腫瘤細胞的死亡過程。

將表型與基因表達相關聯

回收感興趣的活細胞并將獨特的行為直接與基因型或基因表達聯系起來。TCRseq Well Plate試劑盒允許您擴增 TCR α 和 β 鏈,并為下一代測序做好準備(圖4A)。或者使用 OptoSeq Single Cell 3’mRNA 試劑盒對cDNA 進行擴增和測序并分析差異基因表達譜(圖4B)。OptoSeq Single Cell 3’mRNA 試劑盒捕獲所有mRNA,因此與細胞毒性實驗不兼容。

圖4: 直接將功能與基因型或基因表達相聯系。A) 以超過 60% 的效率回收 TCR。B) 揭示促成所需表型的遺傳機制,如多功能性。

將珍貴樣品功能表征最大化

Beacon?平臺的技術核心是 OptoSelect? 芯片,其中包含數千個NanoPen? 小室。使用光電定位 (OEP)(圖5)將單個T細胞分類和分離或加載到NanoPen?小室中。加載后,可以對單個T細胞進行多種分析。然后使用軟件直觀地進行分析以選擇感興趣的表型,并指導下游檢測活細胞的回收。

圖5:每個 OptoSelect? 芯片包含數千個NanoPen?小室。

OEP? 用于將細胞加載到 OptoSelect? 芯片上,隨后進行單T細胞分析和回收以用于下游檢測。

尋找最佳T細胞的一站式平臺

使用相同細胞進行多種檢測的能力使人們能夠更好地了解潛在地生物學信息。在各種平臺上單獨進行的傳統檢測很難理解因果關系以及驅動T細胞活動的因素。

Opto? T 細胞功能表征工作流程讓您可以直接將單細胞表型和功能與基因表達聯系起來。

這種將表型與基因表達直接聯系起來的獨特能力為T細胞生物學、免疫反應以及如何設計強大的T細胞療法提供了新的洞見。

欲了解Opto? T細胞功能表征工作流程詳細信息,請您關注“Berkeley Lights”微信公眾號回復“T細胞”獲取完整產品手冊。


關于PhenomeX

PhenomeX(NASDAQ: CELL)致力于助力科學家充分探索每個細胞的潛能,推動功能細胞生物學邁向新紀元,以促進人類健康發展。我們為科學家提供揭示細胞功能的完整見解,使其全面了解每個細胞的深度功能表征。我們經過驗證的獨特高通量工具和服務提供了無與倫比的解決方案,加速了多功能細胞研究發展,成為改善疾病預防和治療的關鍵。我們屢獲殊榮的平臺已獲得全球各地研究人員的高度認可,包括全球前15家制藥公司的研究人員,以及約85%的美國**綜合性癌癥中心的科研人員。

PhenomeX家族的單細胞功能表征平臺(原Berkeley Lights)Beacon?基于其特有的光電定位技術 (OptoElectro Positioning, OEP?) 為廣大科學家提供了先進的研究手段,對數以萬計單細胞的基因信息、功能等進行深入表征,以篩選出滿足用戶需求的目的細胞。Beacon?應用場景涵蓋抗體發現細胞株開發、傳染病研究、免疫學研究腫瘤生物學研究、細胞療法開發基因編輯、農業科學等多個領域,為從事尖端的科研項目及加速企業生物產品的開發提供了前所未有的機遇。

PhenomeX家族的單細胞蛋白質組學平臺(原IsoPlexis)是單細胞多組學不可或缺的重要組成部分,在臨床科研領域,針對評估和檢測人體單細胞免疫能力、篩選癌癥治療方案預測評估臨床療效及安全性等方面有著豐富的成功經驗,為預測病人長期生存、早期篩選治療獲益患者提供了詳實的參考數據,幫助世界各地的科研人員在腫瘤免疫、細胞治療、腫瘤學抗感染免疫研究及疫苗開發、自身免疫病移植免疫等方向取得了眾多突破性成果,助力加速臨床科研、醫學和生命科學行業發展。

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