蛋白純化是很多研究僧經常遇到的實驗,而蛋白純化猶如打怪升級!當我們表達出目標蛋白后,需要將目標蛋白純化出來,將雜蛋白小怪獸一個個消滅分離出去……這個過程通常需要充分的準備時間、優良的裝備、熟練地打怪技能……而往往打怪效果并不理想,我們的目標蛋白也損失慘重!
事情往往在山窮水盡之時出現轉機……新晉打怪神器蛋白純化磁珠幫你無壓力對抗雜蛋白,純化蛋白一步到位?。?!
磁珠純化與傳統預裝柱純化蛋白大比拼
Round 1 操作難易
磁珠純化蛋白簡化實驗操作,無需高速離心和過濾操作、上樣等操作,僅需要孵育、洗滌、洗脫步驟,告別操作繁瑣。
Round 2 操作時間
時間是科研的高成本,傳統預裝柱純化蛋白需要半天時間,而磁珠純化蛋白僅需要小于1小時,磁珠純化蛋白更加節省時間成本。
Round 3 所用設備
實驗室實驗條件有限,沒有良好儀器設備是困擾很多研究僧的難題,傳統預裝柱純化蛋白需要高速離心機、AKTA蛋白純化儀這種昂貴的儀器,并且在設備的準備和維護上需要花費較多精力,而磁珠純化蛋白僅需要混合儀、磁性分離器這種小型的實驗設備即可,使蛋白純化更加簡單方便。
Round 4 純化效果
省時、操作簡便、設備簡單是實驗中錦上添花的條件,作為蛋白純化實驗本身來說,純化效果才是重中之重!從圖中實驗數據可以看到,使用海貍磁珠法純化蛋白獲得的目標蛋白量遠高于層析柱法獲得的目標蛋白量。
His-tag蛋白純化磁珠
蛋白純化中最常見的是帶有組氨酸標簽的蛋白,海貍His-tag蛋白純化磁珠可以高效、快速純化組氨酸標簽蛋白。His-tag蛋白純化磁珠是在瓊脂糖微球的內部填充磁性Fe3O4內核,在表面活化偶聯上亞氨基乙二酸(IDA),然后螯合鎳離子(Nickel),鎳離子(Nickel)可以和蛋白中組氨酸形成配位鍵,將需要純化出來的蛋白結合到磁珠上,最后通過磁性分離器分離出來。
海貍His-tag磁珠純化蛋白效果到底怎樣呢?
圖A. BeaverBeads? IDA與進口同類產品比較
圖A可以看出,海貍磁珠與市場上進口產品相比,一步純化即得到同水平高純度的目標蛋白。一個完整的操作流程即可獲得純度達到95%以上的目標蛋白。
Figure B:Purification of pET32A-VIP8 fusion protein by BeaverbeadsTM His-tag protein purification kit. Lane
M:protein molecular mass marker; Lane 1: induced whole BL21(DE3)-Pet32a-VIP8 protein;
Lane 2: supernatant of bacterial lysate; and lane 3:purified pET-32a-VIP8 fusion protein.
Cite: Molecules 2017, 22, 1963; doi:10.3390/molecules22111963
圖B 中可以看出,使用海貍his-tag標簽蛋白純化磁珠可以成功獲得目的蛋白,且獲得的蛋白純度可以達到95%以上。









