茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)-軟件手冊-資訊-生物在線

茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)

作者:上海雅吉生物科技有限公司 2021-06-02T00:00 (訪問量:6117)

?茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)



茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶葉中多酚類物質的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占 60~80%, 具有 C6-C3-C6 碳骨架結構,是一種重要的天然抗氧化物質,能夠清除自由基。類物質茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,是形成茶葉色香味的主要成份之一,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物質具解毒和抗輻射作用,能有效地阻止放射性物質侵入骨髓,并可使鍶 90?和鈷 60?迅速排出體外。


Leagene?茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應,生成穩定紫藍色化合物,以分光光度計 540nm?處測定吸光度,在一定范圍內吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標準曲線比較進而計算茶多酚含量,該試劑盒主要用于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。


產品組成:

編號
名稱
TO1203
50T
Storage
試劑(A): 茶多酚標準(1mg/ml) 2ml 4℃ 避 光
試劑(B): TP Assay buffer 75ml 4℃
試劑(C): TP 顯色液 25ml 4℃ 避 光
使用說明書 1 份
自備材料:
1、茶葉、綠茶等待測樣本
2、蒸餾水
3、研缽、200 目細胞篩
4、離心管或試管
5、水浴鍋或電爐
6、離心機
7、比色杯、分光光度計

操作步驟(僅供參考)
1、準備樣品:
①植物樣品:取 0.2g 植物組織,研磨成粉末,加入煮沸的蒸餾水 10ml,沸水浴浸提
20min,用 200?目細胞篩過濾,濾渣再繼續置于新的煮沸的 10ml?蒸餾水,相同操作提取一次,合并兩次濾液,5000r/min?離心 15min,取上清液,即為茶多酚提取液。4℃ 避光保存,用于茶多酚的檢測。綠茶等液體樣本可直接用本試劑盒測定。
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備后可直接用本試劑盒測定。
③細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要可用蒸餾水進行適當勻漿, 5000r/min 離心 15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存。
④高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,可以使用蒸餾水進行適當稀釋。
2、配制系列茶多酚標準:用蒸餾水和茶多酚標準(1mg/ml),按下表進行操作,依次稀釋。
加入物(μl) 1 2 3 4 5 6
茶多酚標準(1mg/ml) 10 25 50 150 250 400
蒸餾水 490 95 450 350 250 100
相當于茶多酚含量(μg/ml) 20 50 100 300 500 800
3、TP?加樣:按照下表設置空白管、標準管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡。如果樣品中的 TP?濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置 2?平行管,求平均值。

加入物(ml) 空白管 標準管 測定管
蒸餾水 0.5 0.25 0.25
系列茶多酚標準(1~6 號) 0.25
待測樣品 0.25
TP 顯色液 0.5 0.5 0.5
TP Assay buffer 1.5 1.5 1.5
4、TP 測定:以空白調零,比色杯光徑 1.0cm,分光光度計測定 540nm 處標準管、測定管的吸光度。

計算:

以系列茶多酚標準濃度(1~6?)(20、50、100、300、500、800μg/ml)為橫坐標, 以對應的吸光度為縱坐標,繪制標準曲線,求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得提取液中 TP?含量。
組織樣本 TP 含量(μg/g)= (C×VT)/(W×VS)
式中:C=根據標準曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml) VT=提取液的總體積(ml)
W=組織樣本的重量(g)
VS=測定時所用提取液的體積(ml)
?

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茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶葉中多酚類物質的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占 60~80%, 具有 C6-C3-C6 碳骨架結構,是一種重要的天然抗氧化物質,能夠清除自由基。類物質茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,是形成茶葉色香味的主要成份之一,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物質具解毒和抗輻射作用,能有效地阻止放射性物質侵入骨髓,并可使鍶 90?和鈷 60?迅速排出體外。


Leagene?茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應,生成穩定紫藍色化合物,以分光光度計 540nm?處測定吸光度,在一定范圍內吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標準曲線比較進而計算茶多酚含量,該試劑盒主要用于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。



產品組成:

編號
名稱
TO1203
50T
Storage
試劑(A): 茶多酚標準(1mg/ml) 2ml 4℃ 避 光
試劑(B): TP Assay buffer 75ml 4℃
試劑(C): TP 顯色液 25ml 4℃ 避 光
使用說明書 1 份
自備材料:
1、茶葉、綠茶等待測樣本
2、蒸餾水
3、研缽、200 目細胞篩
4、離心管或試管
5、水浴鍋或電爐
6、離心機
7、比色杯、分光光度計

操作步驟(僅供參考)
1、準備樣品:
①植物樣品:取 0.2g 植物組織,研磨成粉末,加入煮沸的蒸餾水 10ml,沸水浴浸提


20min,用 200?目細胞篩過濾,濾渣再繼續置于新的煮沸的 10ml?蒸餾水,相同操作提取一次,合并兩次濾液,5000r/min?離心 15min,取上清液,即為茶多酚提取液。4℃ 避光保存,用于茶多酚的檢測。綠茶等液體樣本可直接用本試劑盒測定。
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備后可直接用本試劑盒測定。
③細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要可用蒸餾水進行適當勻漿, 5000r/min 離心 15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存。
④高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,可以使用蒸餾水進行適當稀釋。
2、配制系列茶多酚標準:用蒸餾水和茶多酚標準(1mg/ml),按下表進行操作,依次稀釋。
加入物(μl) 1 2 3 4 5 6
茶多酚標準(1mg/ml) 10 25 50 150 250 400
蒸餾水 490 95
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