長期以來，肺癌一直是全世界發病率和死亡率最高的癌癥。近幾年腫瘤免疫治療快速發展， PD-1免疫檢查點抑制劑振奮人心的臨床效果為實體瘤患者重新帶來嶄新的希望。在肺癌，尤其是缺少特定突變，沒有靶向藥可用的非小細胞肺癌(NSCLC)的研究中，都會優先推薦PD-1抑制劑。PD-1抑制劑治療效果雖好，但效率卻不高。原因之一是缺乏激活的腫瘤特異性T細胞，PD-1抑制劑無法有效發揮激活T細胞作用的效應。因此PD-1/L1抑制劑和其他療法的組合已經漸漸成為目前產業界另一個重要的發展方向，聯合細胞治療便是其中的一條途徑。細胞治療可以為患者提供大量具有腫瘤特異性的T細胞，進入到復雜的腫瘤微環境發揮強大的腫瘤殺傷效應。
腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)在轉移性黑色素瘤等多個癌癥患者的治療中都取得了很好的療效，但尚未在轉移性NSCLC評估過。近期杜克大學(Duke University)和莫菲特(Moffitt)的研究人員在《Nature Medicine》發表了使用TILs聯合nivolumab治療PD-1耐藥的轉移性晚期NSCLC的一項單臂開放性I期臨床試驗的成果。
圖1：臨床試驗研究設計示意圖
在這項I期臨床試驗研究中，共招募了20名NSCLC患者，一半吸過煙，PD-L1表達為0%的有8人，表達＞50%的有6人，4位患者具有EGFR突變。該試驗的主要終點為治療的安全性，次要終點包括客觀緩解率、緩解的持續時間以及T細胞的持久性。研究人員使用白細胞介素2擴增培養患者自體腫瘤組織來源的TILs。與此同時，患者接受了至少4個周期的PD-1單抗治療?；颊呓邮墉h磷酰胺和氟達拉濱清除淋巴細胞，給TIL騰出空間，以利于其在體內更好地定植繁衍。然后輸注TIL和白細胞介素-2，隨后接受nivolumab的維持治療。在13例可評估的患者中，3例確認對治療有反應，11例病患發現腫瘤負荷減輕。其中兩名患者在1.5年持續治療后獲得完全緩解。研究人員在接受TIL治療后的患者體內還檢測到了一群能識別多種癌癥突變類型的T細胞，且這群T細胞在治療有效的患者中富集。新抗原反應性T細胞克隆在治療后外周血增殖過程中持續存在。該研究結果表明了TIL細胞治療轉移性肺癌的安全性和有效性，提示TIL療法可成為轉移性肺癌潛在的新治療策略。
圖2：TIL臨床活性與患者生存率分析
為了直接證明TIL治療過程中，外周血的T細胞功能性，該團隊使用了IsoPlexis平臺對TIL治療前后的T細胞的活性與多功能性進行評估。如圖3數據比較顯示了輸注TIL前后，CD4+ T細胞和CD8+ T細胞的PSI， Polyfunctional Strength Index細胞多功能指數，反映了細胞同時表達多種細胞因子及其表達量，再綜合分析因子數及表達量來評估細胞的多功能活性?？梢悦黠@看到CD4+ T細胞和CD8+ T的PSI細胞多功能指數在TIL輸注后顯著增加，進一步證實TIL療法提高T細胞的功能性，對轉移性NSCLC的有效性。IsoPlexis平臺與獨特的數據分析方式可以成為細胞治療特異療效相關的生物學指標或質量評價指標。
圖3：TIL治療前后患者T細胞PSI的情況
IsoLight全自動單細胞功能蛋白質組學分析系統
高度集成的系統，包含液體處理器、清洗站、顯微鏡、細胞培養裝置、微陣列掃描儀的高端分析系統，單次24小時內自動化完成8個芯片的檢測。
IsoCode微流控單細胞分泌蛋白組芯片
每張芯片里含有12,000個獨立的亞納升級別的微室，結合微流控技術，可以捕獲500-1,500個單細胞。此外，獨特的抗體編碼技術可實現單細胞水平上多達32種因子的檢測。
IsoSpeak多維生信分析軟件
自動化生物信息分析軟件，按鈕式界面設計，直觀易使用，結果可視化，綜合性的定量指標——細胞多功能指數(PSI)，可揭示復雜的單個細胞多個因子應答的統計學數據。
參考文獻
Precopio, M. L. et al. Immunization with vaccinia virus induces polyfunctional and phenotypically distinctive CD8+ T cell responses.J. Exp. Med. 204, 1405–1416 (2007)
Miltenyi Biotec
成立于2013年的IsoPlexis公司總部位于美國的康涅狄格州，是一家專注于單細胞多重功能蛋白質檢測解決方案的**供應商。自2018年商業化以來，已在全球成功裝機超過150臺，是眾多國際知名研究機構和制藥廠商的合作伙伴，相關文獻發布超過100篇，并有多篇高分文章發布在Nature、Cell、Immunology等刊物上。
IsoPlexis致力于提供業內廣受贊譽的精準單細胞分析系統，助力加速對抗癌癥及各種疑難病癥的進程。通過揭示細胞亞群中獨特的免疫生物標志物，推動免疫療法及靶向治療邁向更精準、個性化的發展階段。
