? ? ? RNA提取的實(shí)驗(yàn)步驟為:破碎組織一分離RNA一沉淀RNA一洗滌RNA一融解RNA一保存RNA。其中樣品細(xì)胞和組織的有效破碎更是在RNA提取的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中起到關(guān)鍵作用，前期細(xì)胞破碎的不完全，會(huì)導(dǎo)致后續(xù)實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)各種問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)使用了上海凈信的冷凍研磨儀來(lái)幫助人體宮頸樣品研磨后提取RNA。
冷凍研磨儀+2ml適配器+2ml研磨管若干+3mm和5mm鋼珠若干
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
1、將儀器開(kāi)機(jī)預(yù)冷，溫度設(shè)置為-20℃。
2、將提前剪碎的樣品及研磨珠放入2ml研磨管中，再根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法吸取核酸提取液Trizo。
3、等研磨儀主機(jī)溫度降到-20℃后，把適配器固定到研磨儀主機(jī)中。
4、設(shè)置運(yùn)行參數(shù)參考，65HZ，60S，研磨5次。
注意事項(xiàng)：
1.因?qū)m頸組織中結(jié)締組織較多，準(zhǔn)備樣品時(shí)可先將樣品提前剪碎。
2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需注意平面配平。
3.定期清理適配器及研磨珠，防止殘留的藥品或樣品對(duì)其造 成腐蝕（清洗研磨珠時(shí)需要先用75%的酒精進(jìn)行浸泡4小時(shí)，浸泡完成后再用高壓滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理，最后用超聲波清洗機(jī)進(jìn)行清洗。)??
4.研磨完畢后需關(guān)閉電源，將安全鎖歸位。
? ? ? 細(xì)胞或組織的徹底勻漿對(duì)RNA提取來(lái)說(shuō)，是一個(gè)很關(guān)鍵的步驟。上海凈信冷凍研磨儀能夠有效防止RNA的損失和降解，保留蛋白活性。研磨時(shí)處于封閉狀態(tài)，無(wú)交叉污染，具備安全罩及安全鎖，無(wú)需涉及液氮，安全性高。