?Hoechst 33258染色液使用說明
貨號:C0020 規格:10ml/50ml
保存:-20℃避光保存,一年有效。
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產品簡介:??????
????Hoechst 33258,也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258,是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。Hoechst 33258染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細胞核染色,或常規的DNA染色。Hoechst 33258的最大激發波長為346nm,最大發射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結合后,最大激發波長為352nm,最大發射波長為461nm。本Hoechst 33258染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色,也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。
使用說明:1. 對于固定的細胞或組織:????a. 對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst 33258染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續的Hoechst 33258染色。????b. 對于貼壁細胞或組織切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆蓋住樣品即可;對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。????c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。????d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。?2. 對于活細胞或組織:?????a. 加入適當量Hoechst 33258染色液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,對于96孔板一個孔需加入100微升染色液。?????b. 在適宜于細胞培養的溫度下培養20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。
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