What is RPA?
概念:重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,最佳反應溫度在37°C左右。
RPA技術原理:
重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發生鏈交換反應形成并啟動DNA合成,對模板上的目標區域進行指數式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非常快,一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物。
Who uses RPA?
以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產品,能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測該技術對硬件設備的要求很低,特別適合用于體外診斷、獸醫、食品安全、生物安全、農業等領域。
RPA等溫擴增試劑盒配套試紙條發表的文獻
1、Piepenburg O., Williams C.H., Stemple D.L., Armes N.A.
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4、Cordray MS et al., A Paper and Plasitc Device for the Combined Isothermal Amplification and Lateral Flow Detection of Pla
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