GSH和GSSG檢測試劑盒-自主發布-資訊-生物在線

GSH和GSSG檢測試劑盒

作者:北京百奧創新科技有限公司 2023-03-01T10:24 (訪問量:13863)

? ? ? GSH和GSSG檢測試劑盒(GSH and GSSG Assay Kit)是一種簡單易行的可以分別檢測出GSH(還原型谷胱甘肽)和GSSG(氧化型谷胱甘肽,oxidized glutathione disulfide)含量的檢測試劑盒。
谷胱甘肽(glutathione)是一種由3個氨基酸殘基組成的小肽,全稱為谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸,英文名稱為glutamyl-cysteinyl-glycine,簡稱為glutathione。由于半胱氨酸上的巰基(SH)為谷胱甘肽的活性基團,所以常簡寫為G-SH或GSH。谷胱甘肽包括還原型谷胱甘肽(reduced glutathione, 常稱為GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione disulfide)兩種形式。由于氧化型谷胱甘肽是由兩個GSH通過巰基脫氫而成,所以常簡寫為G-S-S-G或GSSG。還原型谷胱甘肽是絕大多數活細胞中巰基的主要來源,對于維持蛋白質中巰基適當的氧化還原狀態有重要作用,并且是動物細胞中關鍵的抗氧化劑??偣入赘孰闹型ǔ?0-95%為還原型谷胱甘肽。
通過谷胱甘肽還原酶把GSSG還原成GSH,而GSH可以和生色底物DTNB反應產生黃色的TNB和GSSG。適當配制反應體系,前后兩個反應合并起來后,總谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相當于一個顏色產生的限速因素,總谷胱甘肽的量就決定了黃色的TNB形成量。從而通過測定A412就可以計算出總谷胱甘肽的量。用適當試劑先清除樣品中的GSH,然后利用上述反應原理就可以測定出GSSG的含量。用總谷胱甘肽(GSSG+GSH)的量扣除GSSG的含量,就可以計算出GSH的含量。
本試劑盒的具體反應原理如下:


兩個反應相合并:

本試劑盒可以檢測動物組織、血漿、紅細胞、和培養細胞或其它適當樣品中GSH和GSSG的含量。
本試劑盒提供了蛋白去除試劑M,可以更加準確地測定出含有蛋白的樣品中的GSH和GSSG的量。
本試劑盒的檢測下限為0.5μM。一個試劑盒共可以進行100次檢測,可以測定100個樣品的總谷胱甘肽或GSSG的含量,或可以測定出50個樣品中GSH和GSSG的各自含量。
包裝清單:

產品編號產品名稱包裝
S0053-1總谷胱甘肽檢測緩沖液60ml
S0053-2谷胱甘肽還原酶150μl
S0053-3氧化型谷胱甘肽 (GSSG)5mg
S0053-4DTNB4.5mg
S0053-5蛋白去除試劑M1g
S0053-6NADPH4mg
S0053-7DMSO1.5ml
S0053-8GSH清除輔助液2ml
S0053-9GSH清除試劑500μl
說明書1份

保存條件:
-20℃保存,一年有效。GSSG配制成溶液后,需適當分裝,-20℃保存至少3個月有效。DTNB溶解于DMSO后,需適當分裝,-20℃保存至少3個月有效。蛋白去除試劑M配制成溶液后僅限當天使用。NADPH溶解后,適當分裝,-70℃保存。稀釋的GSH清除輔助液和GSH清除試劑溶液均須新鮮配制使用。
注意事項:
本試劑盒檢測時牽涉到氧化還原反應,所有氧化劑或還原劑都會干擾本試劑盒的測定。特別是DTT、巰基乙醇等含有巰基的試劑會嚴重干擾本試劑盒的測定,請盡量避免。
一定要嚴格控制反應時的溫度和反應時間,否則每次都需做標準曲線。
NADPH等試劑不太穩定,要嚴格按照后續說明操作,謹防失活。
蛋白去除試劑M溶液必須新鮮配制并限當日使用。GSH清除試劑也須新鮮稀釋后使用。
蛋白去除試劑M較難溶解,可以通過劇烈vortex并適當加熱(不超過37℃)以促進溶解。
DMSO在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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