酶切點位
5'-G↓GATCC-3'
3'-CCTAG↑G-5'
產品信息
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產品名稱 | 產品編號 | 規格 |
FuniCut? BamHI | 15003ES76 | 500 T |
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產品描述
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FuniCut?系列內切酶是通過基因工程重組技術,可在5~15 min內精確完成DNA切割的快速限制性內切酶,適用于快速切割質粒DNA、PCR產物、基因組DNA等。FuniCut?系列快速內切酶共用一種酶切緩沖液,從而簡化了酶切反應體系,另外,有良好的酶活冗余度,可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。
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產品組分
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組分名稱 | 產品規格 | |
15003-A | FuniCut? BamHI | 500 μL |
10×FuniCut? Buffer | 3×1 mL | |
15003-C | 10×FuniCut? Color Buffer | 3×1 mL |
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運輸與保存方法
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冰袋運輸。-20°C保存,有效期2年。
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酶活定義
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37°C下,在20 μL反應體系中,1 μL酶能夠在15 min內完全消化1 μg λDNA所需的酶。
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識別位置
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5'-G↓GATCC-3'
3'-CCTAG↑G-5'
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推薦反應條件
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1× FuniCut? 緩沖液;
最適37°C孵育。
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失活條件
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不可熱失活,請使用酚氯仿抽提或柱純化。
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注意事項
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1)3 h孵育未表現星號活性,延時酶切可能出現星號活性;
2)不可熱失活;
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作;
4)本產品僅作科研用途!
質量控制
1. 功能活性檢測:最適反應溫度下,在20 μL反應體系中,1 μL酶能夠在15 min內完全消化1 μg λDNA。
2. 超長時間孵育檢測:最適反應溫度下,將1 μL酶與1 μg λDNA共孵育3 h,未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解,但延長孵育時間可能出現星號活性。
3. 酶切-連接-再酶切檢測:最適反應溫度下,使用1 μL酶消化底物,回收酶切產物,在22°C下使用適量T4 DNA連接酶可以將酶切產物重新連接,將連接產物再次回收后,使用相同的內切酶可以重新切開連接產物。
4. 非特異性內切酶活性檢測:最適反應溫度下,將1 μL酶與1 μg超螺旋質粒DNA共同孵育4 h后,使用瓊脂糖凝膠電泳檢測,質粒DNA仍然處于超螺旋狀態。
5. 藍白斑檢測:將含有單一lacZα基因的載體以1 μL酶消化,重新連接后轉化入大腸桿菌感受態細胞,涂布在含有對應抗生素、IPTG和X-gal的LB培養基平板上。連接正確的產物會生長出藍色菌落,而連接錯誤(即DNA末端切口不完整)的產物將得到白色菌落。對于FuniCut?系列限制酶而言,白色菌落比例應小于1%。
使用方法
北京百奧創新科技有限公司 商家主頁
地 址: 北京市海淀區創客小鎮
聯系人: 魏
電 話: 4008883135
傳 真: 01057187533
Email:customer@bestopbio.com;3007606172@qq.com
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