Biodropsis BD-1000/BD-2000型是專為測量核酸和蛋白濃度而設計的超微量分光光度計。獨有的樣品保留系統通過表面張力來把樣本保留在兩根檢測光纖中間,使得儀器在無需比色皿的前提下,直接檢測較高濃度的樣本。BD-1000在2秒鐘以內即可完成樣品測量,BD-2000在8秒內可完成樣品測量獲得高精度和高重復性的結果。
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Biodropsis超微量核酸蛋白分析儀主要用于檢測核酸包括dsDNA、ssDNA、RNA和純化后蛋白包括BSA、igG、lysozyme等純度較高的蛋白。這款儀器體積小,上樣只需要0.5-2ul,檢測時間短,測量濃度范圍大,操作簡單,不需要比色皿,減少了耗材的費用,減少了比色皿帶來的實驗誤差。

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Biodropsis超微量核酸蛋白分析儀的設計原理是基于Beer-Lambert定量設計的。根據核酸在260nm處、蛋白在280nm處有特定的吸收峰來測量核酸、蛋白的濃度。當測量一個取樣時,穿透取樣溶液的光強度被記錄下來。取樣溶液的強度和空白強度被用來計算取樣吸光率的公式如下:

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Beer-Lambert方程:A = E * b * c
A是吸光率,單位為A;E是基于波長的摩爾吸光度系數(或者說是吸光度系數)單位為L/mol-cm;b是通道長,單位為cm;c分析物濃度,單位為mol/L或摩爾濃度(M)。在已知A、b、E的情況下,我們可以得出c值。

Biodropsis超微量核酸蛋白分析儀的使用誤區:
1)測量核酸時發現結果不準:首先要確定核酸樣品的純度,如果是DNA樣品,260/280比值應該在1.6-2.0之間。比值小于1.6說明有蛋白類物質的干擾,大于2.0說明有 RNA的干擾。如果是RNA樣品,260/280應該大于2.0,如果值偏高如2.5以上,可能是RNA降解的原因,如果小于2.0說明有蛋白類物質的干擾。我們還可以通過230nm、和320nm處的吸收峰來判斷樣品的純度,230表示存在以下污染物如:碳水化合物、多肽、苯酚等,核酸和蛋白在320nm處的吸收峰幾乎為零,所以如果有吸收說明有雜質,可能是稠環芳香有機試劑的污染。
2)適合測量純度高的蛋白樣品,不能測量含有雜質的蛋白樣品:通過上面的公式我們能夠發現,c值是與吸光度A成正比的,如果樣品中含有雜質成分,且雜質在280處有吸收峰的話就會造成測量值不準,一般我們提蛋白過程中使用的有機試劑如果殘留的話就會造成測量蛋白值不準的情況。
3)測量兩個樣品中間務必要用吸水的面巾紙和蒸餾水清潔測量臂:如果不做清潔,殘留的樣品會對后來樣品的測量造成影響。切記不要用擦鏡紙擦拭,因為擦鏡紙不吸水。
4)測量同一個樣品的時間不宜過長:因為上樣量很少,隨著時間的推遲樣品會有所蒸發,造成測量出來的濃度有誤差。
5)如果測量值不是很準,建議可以把樣品稀釋到適當濃度再進行測量。
6)如果感覺機器的平衡性不好,可以通過以下方法檢測:以空氣為blank,反復測量空氣,兩次測量之間間隔5秒,測出的吸光度值應該小于0.04,說明平衡性良好。
