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TwistDx客戶常見問題匯總--勝創
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來自勝創生物
RPA?Kit詳解：
TwistAmp?Basic基本組分：
96次凍干RPA小球真空包裝（室溫保數天不會改變活力）
TwistAmp?水化buffer
醋酸鎂（280mM）
對照模板及引物mix
存貯：-20℃?長期保存，6個月內保證完整活性。
檢測方法：
末段檢測：凝膠電泳，三明治法如側向流檢測；
基于探針的熒光檢測。
反應條件：
反應參數受組分濃度，最大產物長度，反應溫度，動態變化。
為了便于客戶使用，TwistDxAmp試劑盒反應條件可由客戶自行優化。
常規條件如下：
1?絕大多數快速檢測10-12min
2?500bp以下擴增長度
3?適用溫度37-42℃
如改變擴增條件，可減緩反應速度，更適用于定量檢測，更長的擴增片段（長達2kb），明顯降低反應溫度。
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TwistAmp系列擴增試劑盒組分：
TwistAmp?RT?Basic
除以上組分外，還加有通用的逆轉錄酶，但不含Rnase抑制劑。
TwistAmp?Exo
除基本組分外，還含有內切酶3，減少擴增產物的末端拷貝量，所以不能用于電泳分析，但在RPA系統中產生更強的動態熒光信號，便于實時定量。
TwistAmp?RT?exo
除Amp?Exo?的基本組分外，外加通用的逆轉錄酶，但不含Rnase抑制劑。
TwistAmp?fgp?
除了基本組分外，有一個高效的fgp核酶，在RPA反應過程中，此酶不會對末端輸出拷貝有影響，所以不同于exo?，此試劑盒也可用于電泳分析。
TwistAmp?nfo
末端三明治法快速檢測，如側向流試紙法
除基本組分之外，?nfo核酶，和適合是LF?探針?形成新的聚合酶增強底物，無需任何儀器。本品可通過加入exo探針作為Amp?exo?kit的替代物，進行熒光定量檢測，由于核酶延緩動態反應速度，可用于末端電泳檢測。
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