測定飼料中添加劑維生素A的高效液相色譜法(HPLC)-分析方法-資訊-生物在線

測定飼料中添加劑維生素A的高效液相色譜法(HPLC)

作者:杭州爾首科學儀器有限公司 2013-04-22T00:00 (訪問量:10279)

?????? 維生素A是復雜機體必需的一種營養素,維持正常的視覺反應。 維持上皮組織的正常形態與功。 維持正常的骨骼發育。它以不同方式幾乎影響機體的一切組織細胞。盡管是一種最早發現的維生素,但有關它的生理功能至今尚末完全揭開。就目前的知識而言,維生素A(包括胡蘿卜素)最主要是生理功能包括:①.維持視覺 ②.促進生長發育? ③.維持上皮結構的完整與健全 ④.加強免疫能力 ⑤.清除自由基。

測定飼料中添加劑維生素A
的步驟如下:

1.? 試劑和溶液
1.1 標準溶液的制備
(1)維生素A乙酸酯標準品:維生素A乙酸酯含量≥99.0%
(2)維生素A乙酸酯標準貯備液:稱取維生素A乙酸酯標準品34.4mg(精確至0.00001g)于棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,混勻,4℃保存,該貯備液濃度為344ug/ml(1000IU/ml)。
(3) 維生素A乙酸酯標準工作液:準確吸取維生素A乙酸酯標準貯備液1.0ml于100ml棕色容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,混勻,配置工作液濃度為3.44ug/ml(10IU/ml)。
1.2試樣溶液制備
稱取試樣1g,精確至0.0001g,置于100ml的棕色容量瓶中,加入約80ml的甲醇,瓶塞不要擰緊,于60℃超聲波水浴中超聲提取30min,冷卻至室溫,用甲醇稀釋至刻度,充分搖勻。如果試樣中維生素A乙酸酯的標示量低于107IU/kg,則將溶液用0.45um的濾膜過濾,進樣測定,否則需將溶液用甲醇進一步稀釋,使維生素A乙酸酯的進樣濃度與維生素A乙酸酯標準工作液接近。

2.色譜條件

? (1)色譜柱:VERTEX? C18柱4.6*150mm*5um? (2)流動相:甲醇:水=98:2
? (3)流速:1.2ml/min
? (4)檢測波長:326nm
? (5)進樣量:20ul
? (6)溫度:室溫

3.儀器

?? 水浴超聲波,高效液相色譜儀LC-10Tvp,紫外檢測器SPD-10Tvp

4.譜圖





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