產品簡介
由于食品成分復雜，除含有多種原料組分外，還含有鹽、糖、油、色素等食品添加劑，
此外，加工過程中的煎、炸、煮、烤等工藝也會使原料中的DNA會受到不同程度的損壞。因
此，從加工食品中提取DNA比從原材料中提取DNA相對的困難。
本試劑盒采用獨特的緩沖液系統，特別適合從深加工食品中提取DNA。無需酚/氯仿抽
提，使用安全快捷方便，可有效去除深加工食品中的蛋白、脂肪及其他有機化合物等雜質。
使用本試劑盒提取的深加工食品DNA可適用于各種檢測，包括PCR、熒光定量PCR實
驗。
產品特點
簡單快速：2 h左右（不包括預處理時間）即可獲得高質量的DNA。
純 度 高：獲得的DNA可直接用于PCR、熒光定量PCR等分子生物學實驗。
得 率 高：從100 mg樣品中即可獲得足夠用于PCR檢測的DNA量。
注意事項：請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
1．醬油、番茄醬等樣品應進行預處理，以達到好的提取效果。特殊樣品請咨詢本公司后進
行提取。
2．如果緩沖液GMO1中出現沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，搖勻后使用。
3．所有離心步驟均為使用臺式離心機，室溫下離心
操作步驟
針對醬油含有較多焦糖色素、番茄醬pH值過低等不利于DNA提取的特點，在正式進入試劑
盒提取之前，應對提取樣品進行預處理。
醬油樣品預處理：取醬油30 ml，加入60 ml無水乙醇混勻，置冰箱（-20℃）放置10 min后，
10,000 rpm離心10 min。棄上清，在沉淀中加入30 ml 0.1M Tris.Cl(pH8.0)溶液，用力搖勻，
全部轉移至100 ml燒杯中，于磁力攪拌器上攪拌2 h。分裝至1.5 ml離心管中，12,000 rpm離
心10 min。棄上清，加入1.5 ml 0.1M Tris.Cl(pH8.0)溶液，渦旋振蕩至塊狀打散，12,000 rpm
離心10 min。棄上清，沉淀中的焦糖色素及鹽等小分子已全部去除，可直接用于DNA提取。
番茄醬樣品預處理：取番茄醬液態加工樣品1.5 ml于離心管中，10,000 rpm離心15 min。棄
上清，用1 ml 0.1M Tris.Cl溶液洗滌樣品3次，振蕩混勻，10,000 rpm離心15 min。棄上清，
留沉淀待用。
1. 稱取研碎的深加工食品100 mg或上述預處理的樣品，加500 μl緩沖液GMO1和20 μl的
Proteinase K (20 mg/ml)，旋渦振蕩1 min。
2. 56℃孵育1 h。孵育過程中每15 min振蕩一次。
3. 加入200 μl緩沖液GMO2，充分混勻，渦旋振蕩1 min，室溫靜置10 min。
4. 12,000 rpm(~13,400×g )離心5 min，將上清轉移至新的離心管中。
5. 向上清液中加入0.7倍體積的異丙醇，充分混勻。（例如500 μl的水相溶液加350 μl異
丙醇），12,000 rpm(~13,400×g )離心3 min，棄上清，保留沉淀（此步沉淀可能看不
見）。
注意：加異丙醇沉淀后，棄上清應小心，防止把DNA倒出。
6. 可選步驟：在步驟5加異丙醇之前，向上清液中加入1 μl Carrier RNA（醬油、番茄醬必
加），再加入異丙醇。（Carrier RNA目錄號：RT416-02）
7. 加入 700 μl 70%乙醇，渦旋振蕩5 sec，12,000 rpm(~13,400×g )離心2 min，棄上清。
8. 重復操作步驟7。
?
注意：棄上清應小心，防止把DNA倒出。
9. 開蓋倒置，室溫5-10 min，徹底晾干殘余的乙醇。
注意：乙醇的殘留會影響后續的酶反應（PCR、熒光定量PCR等）實驗。
10. 加入20-50 μl洗脫緩沖液TE，旋渦振蕩1 min，最終得到DNA溶液。
DNA提取效果檢測
由于深加工食品中DNA含量非常低，普通瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計等方法都不
能很準確的檢測，一般用PCR或熒光定量PCR來檢測DNA提取效果。
如采用TIANGEN 公司2×Taq PCR MasterMix II (目錄號：KT211)進行DNA提取效果檢
測（Lectin基因、Zein基因、Patatin基因檢測）：
反應體系
PCR反應體系的建立，20 μl體系如下：
組成成份 體積
?2×Taq PCR MasterMix II 10 μl
引物-F (10 μM) 0.5 μl
引物-R (10 μM) 0.5 μl
模版 4 μl
?ddH2O 5 μl
反應條件
95℃ 3 min
95℃ 30 sec
50-65℃ 30 sec 35 cycles
72℃ 30 sec
72℃ 3 min
結果檢測
反應結束后取5-10 μl反應產物，瓊脂糖凝膠電泳檢測
儲存條件 該試劑盒置于室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存12個月，更長時間的保存可置于 2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產生沉淀，使用前應將試劑盒內的溶液在室溫放置一段時 間，必要時可在37℃水浴中預熱10 min，以溶解沉淀