Biomic V3微生物鑒定儀質控流程及注意事項-分析方法-資訊-生物在線

Biomic V3微生物鑒定儀質控流程及注意事項

作者:北京五洲東方科技發展有限公司 2011-05-05T00:00 (訪問量:8917)

  BiomicV3微生物鑒定儀是由美國 Giles scientific公司生產的,利用數字成像技術進行微生物檢驗的專用設備。該設備可讀取市面上最常見的三種鑒定卡:API (bioMerieux), Crystal (BD) and RapID (Remel),進行微生物鑒定。


  為了保證檢驗結果的準確性,需要在安裝調試階段對鑒定結果進行有效質控,下面以梅里埃鑒定卡 API 20E為例,說明 Biomic V3的質控流程。
  我們知道,培養基、鑒定卡、試劑、操作與環境等條件都對鑒定結果的準確性產生影響。在確定以上因素都適合的情況下,即可利用標準菌株,進行質控試驗對軟件進行調試,使得鑒定結果準確無誤。
  此次我們采用的標準菌株包括大腸桿菌,沙門氏菌和阪崎腸桿菌,這三種菌株是食品質量安全控制中,非常典型的三種致病菌;鑒定卡 API 20E是在食品腸道致病菌檢測中廣泛應用的鑒定卡。該鑒定卡是由 20個含干燥底物的小管所組成。這些測定管用細菌懸浮液接種。培養一定時間后,通過代謝作用產生顏色的變化,或是加入試劑後變色而觀察其結果。
  試驗流程如下:
  (1)標準菌株培養后,挑取單菌落,加入 NaCl 0.85% 懸浮液中混勻成為菌懸液備用。
  (2)用吸管將細菌懸液充滿檬酸CIT、VP各GEL管;其它管僅充滿管部(不是杯部)。
  (3) ADH、LDC、URE、ODC和H2S,則用礦物油覆蓋。
  (4)蓋上蓋子,孵育於35~37°C 18~24小時。
  (5)在VP, TDA, IND中加入附加試劑。
  (6)放入BIOMIC的抽屜里,進行結果判讀。
  試驗注意事項包括:
  (1)挑取純培養的單菌落。如有對于濃度有要求的鑒定卡,要用比濁儀檢測達到需要的濁度。
  (2)在裝鑒定卡的塑料殼子內,加入適量水分保持濕度,避免培養時烘干。
  (3)最好使用梅里埃的相關試劑,不要使用過期試劑。
  (4)加樣時注意,充滿管部還是杯部。
  (5)在使用前,所有附加試劑需達到室溫(20-30°C)。
  (6)使用後,所有的安瓿,試驗條和培養盒在處置之前都必須高壓滅菌,燒成灰或浸泡於殺菌劑中。
  根據結果的圖像和數據,進行軟件調節,按照上述方法再進行一次質控試驗,進行結果
判讀,最后得到的結果如下:
  沙門菌屬 Salmonella sp. 結果概率99.8 % 典型
  (ONPG -) (ADH +) (LDC +/-) (ODC +) (CIT +) (H2S +) (URE -) (TDA -) (IND -) (VP -)
  (GEL -) (GLU +) (MAN +) (INO +) (SOR +) (RHA +) (SAC -) (MEL -) (AMY -) (ARA +)


  阪崎腸桿菌 Ent. Sakazakii 結果概率97.3 % 很典型
  (ONPG +) (ADH +) (LDC -) (ODC +) (CIT +) (H2S -) (URE -) (TDA -) (IND -) (VP -)
  (GEL -) (GLU +) (MAN +) (INO +) (SOR -) (RHA +) (SAC +) (MEL +) (AMY +) (ARA +)

?


  大腸埃希菌 E. coli 結果概率99.6 % 很典型
  (ONPG +) (ADH -) (LDC +) (ODC +) (CIT -) (H2S -) (URE -) (TDA -) (IND +) (VP -)
  (GEL -) (GLU +) (MAN +) (INO -) (SOR +) (RHA +) (SAC +) (MEL +) (AMY -) (ARA +)

?

  至此,質控完畢,可進行樣品檢測。

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