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大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)酶聯(lián)免疫

作者:上海聯(lián)碩生物科技有限公司 2011-12-20T00:00 (訪問量:6011)

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?大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1SDF-1)酶聯(lián)免疫

????????? 檢測試劑盒使用說明書

使用前仔細(xì)閱讀本說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術(shù)原理,檢測大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1SDF-1),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

??? 用于大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1SDF-1)的測定。

工作原理

本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定樣品中大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1SDF-1)水平。向預(yù)先包被了大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1SDF-1)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1SDF-1,溫育;溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗SDF-1抗體。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1SDF-1)的濃度呈正相關(guān)。

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1

1

封板膜

2片(48

2片(96

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品:2400ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8℃保存

鏈霉親和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

生物素標(biāo)記的抗SDF-1抗體

0.5ml×1

1 ml×1

2-8℃保存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

需要而未提供的試劑和器材

1.??? 37℃恒溫箱。

2.??? 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

3.??? 精密移液器及一次性吸頭

4.??? 蒸餾水,

5.??? 一次性試管

6.??? 吸水紙

注意事項(xiàng)

1.??? 2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.??? 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差

3.??? 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

4.??? 為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。

5.??? 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

6.??? 底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中

標(biāo)本要求

1不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

操作程序

1.?????? 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:(本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。)

    1200 ng/L

    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

    120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    上海聯(lián)碩生物科技有限公司 商家主頁

    地 址: 上海市嘉松中路3555號(hào)A1棟

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