摘要:
??? 美國?佐治亞州健康科學大學GHSU細胞生物學和解剖學系的科學家們已經成功地在活的斑馬魚疾病模型上建立了高通量篩選體系。GHSU副教授Jeff?Mumm博士使用帝肯Infinite??M1000 PRO多功能酶標儀,在活的斑馬魚模型上進行藥物篩選的研究。
????Infinite??M1000 PRO多功能酶標儀的Z軸聚焦功能以及卓越的信噪比(>500:1),使檢測靈敏度提高了一個數量級,更重要的是能檢測到相當微弱的信號。
????Mumm博士說:“這一點非常重要,以β細胞的再生為例,幼體斑馬魚體內細胞數量相當少;雖然我們能研究成熟的斑馬魚,但是被篩選出來的成體斑馬魚的細胞數量遠遠少于幼體斑馬魚?;因此對于幼體斑馬魚,我們需96孔板進行培養,但對于成體斑馬魚,我們卻要用到6孔板。為了提高檢測的穩定性,我們對兩種不同熒光基團的比值進行測量——其中一種熒光基團與目標細胞種類相關,另一種熒光基團與環境中的對照細胞相關——我們得到了非常好的Z?值,Quad4?四光柵技術便是它的關鍵。”
??“使用了Infinite??M1000 PRO多功能酶標儀后,我們能夠定量檢測斑馬魚疾病模型中目標細胞的損失與再生,以及疾病相關信號通路中小分子誘導的變化;?更重要的是,Infinite???M1000 PRO多功能酶標儀高信噪比使得我們能夠監測個體斑馬魚長達數天內的變化。?我們已經通過鑒別自發熒光基團、鑒定報告基團的多樣性以及開發適用于高通量篩選的多孔板模式對實驗體系進行了優化。?”
?????最后,Mumm博士總結道:“Infinite??M1000 PRO幫助我們開發了這個簡單,快速,低成本的自動化定量系統,該系統可廣泛應用于以活的斑馬魚為模型、以熒光或發光信號為報告的高通量化合物篩選或遺傳篩選?!?
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