? ? ? 過去,研究者使用傳統顯微鏡進行細胞示蹤或形態分析,會面臨種種困難和不便。首先,研究人員需要給細胞提供合適的培養環境以保持細胞在觀察過程中的健康狀態。在傳統應用領域,通常通過在傳統顯微鏡上加載活細胞培養系統來實現活細胞的連續觀察。而這種活細胞觀測系統價格非常昂貴。其次,如果實驗室沒有能夠自動成像的顯微鏡,用戶還需要在特定的時間點進行反復的開機、調焦、拍照、關閉光源等無聊的步驟。如果是過夜運行,此過程將更加繁瑣。再次,就算是實驗室平臺有高級的自動化活細胞成像系統,用戶也會經常面臨使用時間受限及實驗時間沖突等問題。
? ? ? 由美國Etaluma公司開發設計的LumaScope細胞成像系統,能夠很好解決用戶的上述困擾,輕松實現細胞示蹤或形態學研究。通過結構優化,LumaScope緊湊的結構、多色自動化成像、抗高濕度環境等特性,使得它成為了實驗室活細胞成像研究的利器。而且LumaScope平臺式的載物臺設計,可以兼容玻片、培養皿、培養瓶和多孔板等各種細胞培養容器。
一、材料與設備:
l 細胞、培養容器和培養基質;
l CO2培養箱
l LumaScope成像系統;
l Image J軟件(帶Mtracking插件);
二、實驗程序:
1、 用75%乙醇對LumaScope主機及USB數據線進行清潔和消毒;
2、 將LumaScope主機放入CO2培養箱中,并通過USB線連接至控制電腦;
3、 將培養容器放在LumaScope載物臺上;
4、 打開Lumaview軟件,調節聚焦旋鈕與載物臺,找到目標區域;
5、 設置Time lapse成像功能參數(此類實驗建議成像時間間隔為20~30min);
6、 啟動Time lapse功能(此過程中用戶不需要守在儀器旁邊);
7、 程序自動結束,可在電腦上通過Image J軟件來分析細胞示蹤數據;
三、實驗結果
LumaScope成像系統能夠在用戶所設定的時間節點進行自動化的成像并保存到控制的電腦上。使用Image J軟件打開圖像文件,生成一個新的圖像棧(image stack)。利用Mtracking 功能逐個進行細胞示蹤分析。
最后,用戶可輕松的獲得單個細胞的示蹤或形態數據。Mtracking還可生成單個細胞的相對excel數據。
四、結論
LumaScope系統是活細胞研究的絕佳利器。它獨特的設計能夠放入各種細胞培養箱并克服高溫、高濕環境。此外,CO2培養箱比其他培養系統所提供的培養環境精度更高和穩定性更好。用戶還可使用熒光標記分析目的蛋白表達或細胞分析,而不需要改變任何培養條件。LumaScope搭配Image J軟件可輕松實現單個細胞的示蹤或形態研究,而且在成本上比升級顯微鏡更為經濟實惠。
LumaScope顯微鏡產品詳細信息可瀏覽:
Etaluma公司網頁http://etaluma.com/products/lumascope
吉泰公司網頁http://www.genetimes.com.cn/product/inst.aspx
