常見問題：
- 如何選擇合適的一抗？
- 如何選擇合適的二抗？
- 如何選擇合適的同型對照？
- 如何選擇陽性對照？
- 如何確定一抗的稀釋比例？
- 如何選擇合適的抗原修復方式？
- 為何WB檢測條帶大小與預期有差別？
- 抗體能夠用于其他種屬/實驗方法？
- 如何確定抗體是否能用于未經驗證的種屬？
- 抗體能否與該蛋白的其它亞型或同一家族其他蛋白交叉反應?
- 如何保存抗體？
- 如何分裝抗體？
- 能否提供抗體的免疫原序列？
1、如何選擇合適的一抗？
請先確定您要檢測的種屬和使用的實驗方法，然后查找相關產品，根據說明書上描述的“適用種屬和實驗方法”來確定合適的抗體。如果說明書中有明確您要檢測的種屬和實驗方法均經過檢測，則您可以放心地購買該產品。如果說明書中沒有注明您用的種屬和實驗方法經過驗證，那么請參考第8、9、10條。
Abcam網站所有說明書都是根據驗證情況（Abcam實驗室以及客戶）實時更新的，所以可以放心參考！
2、如何選擇合適的二抗?
二抗的選擇原則：
- 針對一抗來源的二抗（比如一抗是小鼠來源的，二抗就要是抗小鼠的）
- 針對一抗Ig亞型的（比如一抗是IgM，二抗就要是抗IgM的抗體）
- 為了增加特異性、降低背景：可以選擇Fab段的抗體（去除Fc段的）、經過標本來源種屬血清吸附的的二抗
- 查看二抗的說明書，選擇經過驗證可以用于相應實驗方法的二抗
Abcam提供各種種屬、各種類型和標記的二抗，完全滿足您實驗的需要：
- 可以通過一抗說明書頁面的“Related Products”來選擇合適的二抗
- 通過產品分類目錄選擇合適的二抗
3、 如何選擇同型對照？
同型對照的主要目的是確定一抗的結合是特異性的，而不是非特異性的Fc受體或與其他蛋白的相互作用。同型對照要與一抗的來源、Ig分型和標記完全一致。例如：一抗是FITC標記，其抗體分型是小鼠的IgG1，則同型對照要選擇是FITC標記的小鼠的IgG1。
Abcam提供各種種屬和Ig分型的同型對照產品，可以在Abcam和51AB的網站，產品分類“Isotype”/“同型對照”中查找和選擇合適的產品
多抗的同型對照：
絕大部分的同型對照產品都是單克隆抗體，因此不適用于作為多克隆抗體的對照（因為多抗含有多種IgG的亞型）。Abcam同樣提供了幾種多抗的同型對照產品，滿足實驗者的需要。
4、如何選擇陽性對照?
陽性對照的使用是一個實驗中確定抗體及檢測系統是否正常工作的依據，也是確定待測標本中是否存在待測蛋白的一個依據！尤其是檢測的標本是不確定是否有待測蛋白表達時。因此當實驗沒有陽性結果出現時，最好的選擇是實驗合適的陽性對照。
大部分Abcam的說明書上都有推薦的陽性對照。但是如果說明書上沒有推薦時，請參考以下條款：
- 看看說明書中是否有Abreviews。任何被其他客戶成功檢測的組織、細胞或者裂解物均可以作為合適的陽性對照！
- 根據說明書上的Swiss-Prot 或 Omnigene 數據庫來查找。這些數據庫經常會列出該蛋白表達的組織，這也可以作為合適的陽性對照！
- 查查該蛋白的GeneCards 吧，這里通常會有蛋白在不同組織的表達水平。
- 如果上述方法還是不能找到合適的陽性對照，推薦您去PubMed 查查發表文章，看看有無文章報道該蛋白表達的細胞和組織
5、如何確定一抗的稀釋比例?
如果說明書中有推薦的稀釋比例，請按照該稀釋比例進行實驗。但是由于標本類型、實驗條件、操作環境等各種因素的影響，推薦濃度僅作為參考。實驗者需要在推薦濃度周圍進行多個濃度梯度的實驗，從中發現最佳的稀釋比例。