瑞氏染色液-分析方法-資訊-生物在線

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瑞氏染色液

作者:上海雅吉生物科技有限公司 2020-11-12T00:00 (訪問量:12964)

?生產(chǎn)的瑞氏染色液(Wright Staining Solution)是一種用于細(xì)胞、血液、骨髓涂片或組織切片等樣品染色的染色液,是血細(xì)胞分析最經(jīng)典和最常用的染色方法之一,可以用于觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),識別各種細(xì)胞及其異常變化。在細(xì)胞學(xué)檢查中,除個別情況,瑞氏染色基本可以解決大部分常見病的診斷問題。

瑞氏染色簡單、省時、易于推廣,且染色較清晰,尤其是細(xì)胞質(zhì)及其中顆粒染色較好,但是對于細(xì)胞核染色質(zhì)及核膜的結(jié)構(gòu)不是很清楚,故為彌補(bǔ)其不足,常常將瑞氏染液與吉姆薩染液聯(lián)合使用。改良吉姆薩染色液、吉姆薩染色液和瑞氏染色液三種染色液的比較如下:

產(chǎn)品名稱 改良吉姆薩染色液(20X) 吉姆薩染色液(10X) 瑞氏染色液
產(chǎn)品編號 C0131 C0133 C0135
主要成分 天青B、天青II-伊紅、亞甲基藍(lán) 天青II和伊紅 亞甲基藍(lán)和伊紅
細(xì)胞質(zhì)顏色 粉紅色或藍(lán)色 粉紅色或藍(lán)色 粉紅色或藍(lán)色
細(xì)胞核顏色 紫紅色或藍(lán)紫色 紫紅色或藍(lán)紫色 紫紅色
特點 將吉姆薩染色和瑞氏染色結(jié)合起來,彌補(bǔ)了兩者各自的缺點 對細(xì)胞質(zhì)著色力較強(qiáng),但細(xì)胞核著色較深,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)顯示不佳 細(xì)胞質(zhì)及其中顆粒染色較好,但細(xì)胞核染色質(zhì)及核膜的結(jié)構(gòu)不是很清晰
用途 主要用于細(xì)胞、血液、骨髓涂片或組織切片的染色 主要用于染色體顯帶、寄生蟲和血細(xì)胞的染色 主要用于血細(xì)胞的染色

瑞氏染色液的主要成分是堿性染料亞甲基藍(lán)(methylene blue)和酸性染料伊紅(eosin)。亞甲基藍(lán)是堿性染料(陽離子染料),生色基團(tuán)包括偶氮基(-N=N-)等;伊紅是酸性染料(陰離子染料),是以氧雜蒽和醌式苯環(huán)作為生色基團(tuán),以羧基(-COOH)為助色基團(tuán)的染料。染色原理是基于在酸性染料中具有染色作用的陰離子和細(xì)胞內(nèi)的堿性物質(zhì)相結(jié)合,而堿性染料中具有染色作用的陽離子和細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)相結(jié)合。各類成分由于自身特性與瑞氏染色液中不同物質(zhì)結(jié)合呈現(xiàn)不同顏色從而得以區(qū)分。在對紅細(xì)胞染色時,原始紅細(xì)胞、早幼紅細(xì)胞胞質(zhì)、核仁含較多酸性物質(zhì),被染成較濃厚的藍(lán)色;中幼紅細(xì)胞既含酸性物質(zhì),又含堿性物質(zhì),被染成紅藍(lán)色或灰紅色;完全成熟的紅細(xì)胞,酸性物質(zhì)徹底消失后,被染成粉紅色。對于白細(xì)胞染色時,嗜酸性粒細(xì)胞胞質(zhì)等呈堿性,與酸性染料伊紅結(jié)合后,被染成粉紅色;細(xì)胞核蛋白、淋巴細(xì)胞胞質(zhì)、單核細(xì)胞胞質(zhì)、嗜堿性粒細(xì)胞胞質(zhì)等呈酸性,與堿性染料亞甲基藍(lán)結(jié)合后,被染成藍(lán)紫色或紫紅色;中性粒細(xì)胞胞質(zhì)呈中性,與伊紅和亞甲基藍(lán)均可結(jié)合,被染成淡紫紅色。血細(xì)胞在本染色液染色后的細(xì)胞質(zhì)顏色見下表:

血細(xì)胞類型 細(xì)胞質(zhì)顏色
成熟紅細(xì)胞(Mature red blood cells) 粉紅色
嗜酸性粒細(xì)胞(Eosinophils) 粉紅色
嗜堿性粒細(xì)胞(Basophils) 藍(lán)紫色
中性粒細(xì)胞(Neutrophils) 淡紫紅色
單核細(xì)胞(Monocytes)、淋巴細(xì)胞(Lymphocytes) 藍(lán)紫色或紫紅色

本產(chǎn)品染色效果好、染色力強(qiáng)、著色清晰。本產(chǎn)品用于HeLa細(xì)胞的染色效果參考圖1。

圖1.瑞氏染色液用于HeLa細(xì)胞染色的效果圖。如圖所示,瑞氏染色液染色后HeLa細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)藍(lán)紫色,細(xì)胞核呈現(xiàn)紫紅色。

注:實際實驗結(jié)果可能會因樣品及實驗條件的不同而存在差異,本圖僅供參考。

按照每樣使用1ml本染色液,本試劑盒的100ml和500ml包裝分別可以檢測100個和500個樣品。如果每樣使用0.2ml本染色液,本試劑盒的100ml和500ml包裝分別可以檢測500個和2500個樣品。

包裝清單:

產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
C0135-100ml 瑞氏染色液 100ml
C0135-500ml 瑞氏染色液 500ml
說明書 1份

保存條件:

室溫避光保存,至少兩年有效。

注意事項:

血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻,以免影響染色和拍照。

染色過深可用流水沖洗或浸泡,也可用乙醇適當(dāng)脫色。

須自備PBS,推薦使用PBS (C0221A)或PBS (10X) (ST476)。

瑞氏染色液對人體有毒,且易燃。操作時請?zhí)貏e小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明:
a.對于石蠟切片:
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。
換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘。
無水乙醇5分鐘。
90%乙醇2分鐘。
80%乙醇2分鐘。
70%乙醇2分鐘。
b.對于冰凍切片:
蒸餾水洗滌2分鐘。
c.對于血液或骨髓涂片:
按照常規(guī)方法制作血涂片或骨髓涂片,自然晾干。
70%乙醇固定10分鐘。
d.對于培養(yǎng)細(xì)胞:
加入70%的乙醇固定10分鐘。
2.瑞氏染色
a.切片或涂片樣品加入適量瑞氏染色液染色3分鐘,然后加入等量PBS,輕輕晃動玻片,與瑞氏染色液混勻,靜置5分鐘。注:如果染色過深或過淺應(yīng)調(diào)整染色時間。
注:如果染色過深或過淺應(yīng)調(diào)整染色時間。
b.用蒸餾水從一側(cè)充分洗滌,干燥后即可在顯微鏡下觀察和拍照。?

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