一、輪狀病毒基本定義與分類
輪狀病毒胃腸炎（rotavirus gastroenteritis， RVGE）是由輪狀病毒（rotavirus，RV）感染引起的全球性常見傳染病，主要臨床表現(xiàn)為嘔吐、水樣腹瀉及低熱，重癥患者可出現(xiàn)脫水與電解質(zhì)紊亂，病情可在數(shù)小時內(nèi)急劇進(jìn)展，甚至導(dǎo)致死亡。
目前根據(jù)血清學(xué)分類方法鑒定的RV可分為A—J 10個群，其中引起嬰幼兒腹瀉的主要為A群。根據(jù)VP4、VP7的抗原性，A群RV又分為G血清型和P血清型，其中最常見的人類G血清型為G1—G4和G9，最常見的P血清型為P[4]、P[6]和P[8]。在我國，G9P[8]、G3P[8]、G1P[8]、G2P[4]和 G3P[4]這幾種血清型組合超過A群輪狀病毒相關(guān)腹瀉病例的70%，其中G9P[8]更是占據(jù)主要流行株的地位[1]。
圖1：輪狀病毒形態(tài)及結(jié)構(gòu)示意圖
二、輪狀疫苗研發(fā)現(xiàn)狀
疫苗接種是預(yù)防輪狀病毒感染最有效的手段。目前全球廣泛使用的主要是葛蘭素史克的單價口服減毒活疫苗（RV1）和默克的五價口服重配減毒活疫苗（RV5），能顯著降低感染率和重癥風(fēng)險。
我國也在積極推進(jìn)輪狀疫苗研發(fā)。蘭州生物制品研究所已開發(fā)單價（LLR）和三價（LLR3）疫苗，臨床試驗(yàn)顯示其能誘導(dǎo)良好免疫應(yīng)答，對本土流行毒株有效。近日，國藥集團(tuán)中國生物武漢生物制品研究所自主研發(fā)的全球首款口服六價重配輪狀病毒減毒活疫苗（Vero細(xì)胞）已獲國家藥監(jiān)局注冊批準(zhǔn)。
表1：全球上市的輪狀病毒疫苗基本情況
在研新型輪狀候選疫苗，目前包含以下幾類：mRNA疫苗、滅活疫苗、重組蛋白疫苗、亞單位疫苗、聯(lián)合疫苗[2]。
mRNA疫苗：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院李紅軍團(tuán)隊(duì)開發(fā)的LNP-mRNA-VP7疫苗，肌注后可誘導(dǎo)高滴度中和抗體和細(xì)胞免疫，具備良好的安全性。
滅活疫苗：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院的ZTR-68株（Vero）和美國CDC的IRV疫苗均顯示良好安全性和免疫原性，后者還可作為口服疫苗補(bǔ)充劑。
重組蛋白疫苗：Blazevic團(tuán)隊(duì)開發(fā)的VP6重組蛋白疫苗，免疫BALB/c小鼠可誘導(dǎo)強(qiáng)效交叉免疫反應(yīng)，并無抗原干擾。
亞單位疫苗：美國NIH開發(fā)的P2-VP8-P[4/6/8]三價亞單位疫苗，基于VP8蛋白，其具備良好穩(wěn)定性和免疫原性。
聯(lián)合疫苗：Bahramali團(tuán)隊(duì)將輪狀VP8蛋白與甲肝VP1蛋白結(jié)合，開發(fā)雙重候選疫苗，動物實(shí)驗(yàn)顯示可誘導(dǎo)強(qiáng)烈免疫反應(yīng)。
表2：候選輪狀病毒疫苗研發(fā)基本情況
三、關(guān)于昌柏科技對輪狀病毒的解決方案
1.毒株種類
昌柏科技擁有多株輪狀標(biāo)準(zhǔn)株及臨床流行分離株；擁有完善的病毒培養(yǎng)體系，并建立了規(guī)范的輪狀病毒載量檢測方法，包括TCID50、免疫斑點(diǎn)檢測及qPCR檢測。
圖2：RV 感染致細(xì)胞典型 CPE
2.免疫原性評價
①結(jié)合抗體檢測：昌柏科技已完成方法學(xué)開發(fā)的輪狀病毒蛋白特異性ELISA方法，用于檢測生物樣本中（血清、糞便）的輪狀病毒特異性IgG、IgA抗體滴度。
圖3：間接ELISA檢測血清中的RV特異性抗體原理示意圖
②中和抗體檢測：昌柏科技通過能夠有效與輪狀病毒高度保守區(qū)蛋白相結(jié)合的單抗的免疫染色，開發(fā)、建立并驗(yàn)證了能夠進(jìn)行中和抗體檢測及藥物篩選的方法，該方法通量高，檢測周期短，可重復(fù)性高，助力受試物快速申報。
圖4：RV中和抗體檢測結(jié)果示意圖
3.動物模型
昌柏科技已建立標(biāo)準(zhǔn)化的Lewis大鼠乳鼠輪狀病毒攻毒模型，其模型特征穩(wěn)定、重現(xiàn)性良好、評價指標(biāo)明確、實(shí)驗(yàn)周期短、符合合規(guī)與申報支持并提供一站式服務(wù)，致力于為客戶提供科學(xué)、規(guī)范、高效的輪狀病毒藥效學(xué)評價解決方案，助力產(chǎn)品申報。
小型豬動物模型亦具備規(guī)范的輪狀病毒攻毒實(shí)驗(yàn)體系與成熟的操作經(jīng)驗(yàn)，可為客戶提供高效、合規(guī)的技術(shù)支持。
圖5：乳鼠糞便病毒載量檢測
圖6：乳鼠回腸組織HE染色結(jié)果
參考文獻(xiàn)：
1、段招軍,李金松,張靜,等.兒童輪狀病毒胃腸炎免疫預(yù)防專家共識（2024年版）[J].中國疫苗和免疫,2024,30(01):95-126.
2、Ghonaim AH, Rouby SR, Nageeb WM, et al. Insights into recent advancements in human and animal rotavirus vaccines: Exploring new frontiers. Virol Sin. 2025;40(1):1-14.
3、Lin X, Li H. Diverse processes in rotavirus vaccine development. Hum Vaccin Immunother. 2025;21(1):2475609.
四、關(guān)于昌柏科技
安吉昌柏科技有限公司聚焦于菌毒應(yīng)用，尤其是傳染病領(lǐng)域，形成了傳染病藥物與疫苗篩選評價、獸用藥物疫苗開發(fā)評價、菌毒種放行檢測等多個業(yè)務(wù)模塊。目前可提供100余種傳染病藥物與疫苗相關(guān)評價管線，覆蓋90%的主流研發(fā)管線。現(xiàn)有菌毒種資源廣泛，覆蓋病毒、細(xì)菌、真菌、支原體，且主要為國內(nèi)三年內(nèi)流行菌毒株。所有臨床菌毒株來源清晰、合規(guī)、可溯源。可使用A/BSL-3級生物安全實(shí)驗(yàn)室，備案14種高致病性病原。A/BSL-2實(shí)驗(yàn)室1000平米以上，備案47種病原，負(fù)壓籠位3000余籠。昌柏科技憑借優(yōu)質(zhì)的服務(wù)，權(quán)威的專家團(tuán)隊(duì)儲備，為國內(nèi)外多家傳染病藥物及疫苗公司長期提供藥效學(xué)評價與臨床生物樣本分析服務(wù)。