pET-N-His-C-His-自主發布-資訊-生物在線

pET-N-His-C-His

作者:北京百奧創新科技有限公司 2023-03-01T10:18 (訪問量:12347)

? ? ? pET-N-His-C-His是一種用于表達N端或C端含有His標簽(His tag)的目的蛋白的原核表達質粒,也可以用于表達N端和C端都含有His標簽的目的蛋白。本質粒為卡那霉素抗性。
本質粒含有T7啟動子/lac操縱子,可以在異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的誘導下高效啟動目的蛋白表達。在多克隆位點的前面和后面,各有一個His標簽的編碼序列,每個His標簽編碼6個組氨酸(6X His)。在多克隆位點按照讀碼框插入目的基因并帶上終止密碼子,就可以表達僅N端帶有His標簽的目的蛋白,如果在NdeI和多克隆酶切位點之間按照讀碼框插入不帶有終止密碼子的目的基因,這樣就可以表達僅C端帶有His標簽的目的蛋白,如果在多克隆位點按照讀碼框插入不帶有終止密碼子的目的基因,這樣就可以表達N端和C端都帶有His標簽的目的蛋白。

? ? ? ?pET-N-His-C-His質粒的主要信息如下:


Feature NucleotidePosition
f1 origin12-467
Kanamycin resistance ORF563-1645
PBR 322 origin2084
LacI coding sequence3518-4597
T7 promoter4988-5004
His tag coding sequence5079-5096
Multiple cloning site(BamHI-XhoI)5097-5144
His tag coding sequence5145-5162
T7 Terminator5230-5276

pET-N-His-C-His質粒(5301bp)的圖譜如下:

pET-N-His-C-His中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pET-N-His-C-His)包括:

AatIIAcc65IAflIIAgeIAhdIAleIAscI
AvrIIBaeIBbvCIBfuAIBmgBIBmtIBsaI
BseRIBsiWIBspMIBsrGIBsu36ICspCIEagI
Eco53kIFseIKpnIMfeINcoINheINotI
PacIPmeIPmlIPspXIRsrIISacISacII
SbfISexAISfiISnaBISpeISrfIStuI
ZraI

pET-N-His-C-His中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pET-N-His-C-His once)包括:

DraIIICAC,NNN`GTG242PspOMIG`GGCC,C4035
PsiITTA|TAA370NmeAIIIGCCGAG(N)19,NN`4041
PvuICG,AT`CG943BstEIIG`GTNAC,C4060
AsiSIGCG,AT`CGC943MluIA`CGCG,T4242
TspMIC`CCGG,G1067BstAPIGCAN,NNN`NTGC4563
XmaIC`CCGG,G1067SphIG,CATG`C4771
SmaICCC|GGG1069SgrAICR`CCGG,YG4923
NruITCG|CGA1286SgrAICR`CCGG,YG4923
AcuICTGAAG(N)14,NN`1597XbaIT`CTAG,A5034
AlwNICAG,NNN`CTG1729NdeICA`TA,TG5074
BssSIC`ACGA,G1968BamHIG`GATC,C5097
BstZ17IGTA|TAC2374HindIIIA`AGCT,T5103
Tth111IGACN`N,NGTC2399PstIC,TGCA`G5109
PflFIGACN`N,NGTC2399EcoRIG`AATT,C5115
PpuMIRG`GWC,CY3136EcoRVGAT|ATC5123
FspITGC|GCA3164SalIG`TCGA,C5127
BglIGCCN,NNN`NGGC3182BglIIA`GATC,T5133
PshAIGACNN|NNGTC3401XhoIC`TCGA,G5139
HpaIGTT|AAC3740PaeR7IC`TCGA,G5139
BssHIIG`CGCG,C3831BlpIGC`TNA,GC5218
ApaIG,GGCC`C4035StyIC`CWWG,G5240

pET-N-His-C-His質粒中推薦使用的測序引物序列如下:
T7 primer (4988-5004): 5′-TAATACGACTCACTATA-3′
pET-R primer (5215-5234): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
pET-N-His-C-His的全序列信息:D2902 pET-N-His-C-His.txt。
包裝清單:

產品編號產品名稱包裝
D2902-1μgpET-N-His-C-His1μg
D2902-100μgpET-N-His-C-His100μg
說明書1份

保存條件:
-20℃保存。
注意事項:
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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