?
| 在核酸分子的恒溫擴增過程中，無論采用LAMP、HDA、RCA、CPA、SMAP等擴增技術，這種高速度的擴增特性，均不可避免的引起假陽性擴增。這種假陽性的擴增情況在LAMP擴增中表現尤為明顯，由于LAMP擴增用到很高濃度的引物，因此難免保證有少量錯配和引物Dimer，這些輕微的污染都會導致在LAMP高速擴增中造成假陽性。優化的反應緩沖液，配合獨有的顯色技術和陰性控制技術建立的預混恒溫mix系列產品，可高靈敏度、高特異性的用于LAMP HNB變色、LAMP紅黃變色、LAMP OG變色、 LAMP 濁度分析、LAMP SYBR Green熒光檢測、HDA熒光檢測、RCA熒光檢測、CPA熒光檢測、SMAP熒光檢測的擴增反應。在LAMP擴增實驗中，與其它公司提供的 DNA/RNA LAMP MasterMix 或 LAMP Mix相比，得益于 Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶的出色性能， Bst 4.0 IsoAmp Red MasterMix具有更快的擴增速度和雜質耐受性。 Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶對dUTP底物的超強識別能力，擴增反應所需的核苷酸底物dTTP可被dUTP完全取代，因此擴增產物均包含dUTP，在配合熱敏UDG的情況下，氣溶膠污染物，將會在起始反應階段被徹底清除。而后續熱敏UDG在65℃條件下3min內，完全不可逆失活；從而既能消除污染物，又能保證核酸正常擴增。因此，應用該試劑能大大降低LAMP反應中由于氣溶膠污染造成的假陽性信號。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
使用特征 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
以2019-nCov核酸擴增為例三種方法的性能比較 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
實例展示 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1、A3824-01 紅黃變色反應（肉眼觀察） 以2019-nCoV 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起始前，下圖為 65 度反應 30min 后。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2、A3824-02 搭配 OG 橙綠變色反應管（A3821）（肉眼觀察） 以2019-nCoV 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起始前，下圖為 65 度反應 20min 后。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3、A3824-03 用于熒光檢測（便攜式恒溫檢測儀） 以2019-nCoV 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起始前，下圖為 65 度反應 26min 后。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 4、A3802 用于HNB變色擴增反應 采用環引物對7個樣本（HHV-6 DNA核酸模板進行恒溫HNB變色檢測反應），NTC為不加模板的對照，產物以HNB顯色如下圖。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 5、首先使用含dUTP的Bst4.0 SYBR Green IsoAmp MasterMix擴增獲得三種基因產物（AFSV P72,Covid-19 N Gene-1，Covid-19 N Gene-2），然后以105拷貝的含U產物作為模板，分別用Bst4.0 SYBR Green IsoAmp MasterMix（with UDG）和Bst4.0 SYBR Green IsoAmp MasterMix 進行擴增，反應結束后統計兩組之間的Ct，結果為：UDG組在30min內幾乎不起峰，無信號；未加UDG組均在4min之前起峰，表明該Bst4.0 SYBR Green IsoAmp MasterMix（with UDG）具有良好的去除殘留模板的能力。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||