大鼠補體4(C4)ELISA實驗原理
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,組織及相關液體樣本中補體4(C4)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠補體4(C4)水平。用純化的大鼠補體4(C4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入補體4(C4),再與HRP標記的補體4(C4)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的補體4(C4)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠補體4(C4)含量。
試劑盒組成:
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試劑盒組成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
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說明書 |
1份 |
1份 |
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封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
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密封袋 |
1個 |
1個 |
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酶標包被板 |
1×48 |
1×96 |
2 |
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標準品:720μg/ml |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2 |
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標準品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2 |
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酶標試劑 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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樣品稀釋液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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顯色劑A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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顯色劑B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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終止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2 |
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濃縮洗滌液 |
(20ml×20倍)×1瓶 |
(20ml×30倍)×1瓶 |
2 |
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/
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