T4 RNA Ligase 2, truncated (T4 Rnl2, truncated或Rnl2 (1-249))，即T4 RNA連接酶2截短型，該酶僅包含T4 RNA連接酶2 N端249個氨基酸，可特異性地將5’端預腺苷?；腄NA或RNA (App-DNA或App-RNA)連接到RNA的3’羥基。
T4 RNA Ligase 2, truncated與T4 RNA Ligase 2的酶活性完全不同，后者是一種ATP依賴的dsRNA ligase，而前者是一種不依賴于ATP的，依賴于5’端預腺苷?；膯捂満怂徇B接酶。
T4 RNA Ligase 2, truncated常用于microRNA (miRNA)等3’端為羥基的單鏈RNA在克隆、高通量測序建庫或PCR檢測等時，在3’羥基端添加5’端預腺苷?；腄NA或RNA接頭。
T4 RNA Ligase 2, truncated只能利用5’端預腺苷酰化的單鏈DNA或RNA作為3’端接頭，因此可以大大降低連接反應的背景，通常是小RNA等建庫時的優先選擇。
T4 RNA Ligase 2, truncated連接時不需要ATP，但需要5’端預腺苷?；?也稱預腺苷化、腺苷酰化或腺苷化)底物。即使在有ATP存在的情況下，T4 RNA Ligase 2, truncated也不能催化連接單鏈DNA或RNA 5'-P末端與3'-OH末端之間形成磷酸二酯鍵。而T4 RNA Ligase 1可以在ATP存在的情況下，催化連接單鏈DNA或RNA 5'-P末端與3'-OH末端之間形成磷酸二酯鍵。因此T4 RNA Ligase 2, truncated特別適用于small RNA library的制備，不管是進行miRNA的測序還是進行directional mRNA-Seq，該酶都可以提高建庫的質量，并有效降低連接反應的背景。
T4 RNA Ligase 2, truncated催化連接AppDNA和ssRNA的效果請參見圖1。
圖1. T4 RNA Ligase 2, truncated和N公司的同類產品(Competitor T4 RNA Ligase 2, truncated)催化連接AppDNA和ssRNA的效果圖。使用本產品或國外N公司的T4 RNA Ligase 2, truncated，即T4 Rnl2(1-249)，在20μl反應體系中加入圖中指定量的本產品或國外N公司的T4 Rnl2, truncated，25℃孵育60 min進行連接反應，反應完畢后立即取樣在65℃孵育20 min終止反應，加入變性上樣緩沖液，在95℃孵育5 min后放至冰浴中，隨后用15%尿素(7M)變性聚丙烯酰胺凝膠進行電泳分析，最終進行核酸染色和熒光成像分析。如圖所示，本產品與N公司的產品相比，具有類似的催化效果。
用途：5’末端預腺苷?；膯捂淒NA或者RNA與單鏈RNA的3’羥基末端連接；cDNA文庫構建中連接5’末端預腺苷?；瘑捂湽押塑账岷托NA；鏈特異性的cDNA文庫(strand-specific cDNA library)構建中連接5’末端預腺苷?；瘑捂湽押塑账岷蚏NA；二代測序中，miRNA文庫構建中RNA的3’末端與接頭之間的連接；cDNA文庫的構建以進行小RNA轉錄組分析(small-RNA transcriptome analysis)。
來源：大腸桿菌表達的重組蛋白，表達基因為T4嗜菌體T4 RNA ligase 2 N端1-249位的氨基酸。
活性單位定義:200 units is defined as the amount of enzyme required to give 80% ligation of a 31-mer RNA to the pre-adenylated end of a 17-mer DNA (Universal miRNA Cloning Linker, Beyotime, Cat. No. R0702) in a total reaction volume of 10 μl in 1 hour at 25℃.
純度：無DNA內切酶和外切酶活性，無RNA酶活性，無蛋白酶活性。
酶儲存溶液：10 mM Tris-HCl (pH7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.1 mM DTT, 50% (v/v) Glycerol.
失活或抑制：65℃加熱20 min可使T4 RNA Ligase 2, truncated失活，或加入蛋白酶K或EDTA也可以抑制其活性。
包裝清單：
| 產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
| R0635S-1 | T4 RNA Ligase 2, truncated (200U/μl) | 25μl |
| R0635S-2 | 10X T4 Rnl2, truncated Buffer | 75μl |
| R0635S-3 | PEG8000 (50%, RNase free) | 400μl |
| — | 說明書 | 1份 |
| 產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
| R0635M-1 | T4 RNA Ligase 2, truncated (200U/μl) | 100μl |
| R0635M-2 | 10X T4 Rnl2, truncated Buffer | 300μl |
| R0635M-3 | PEG8000 (50%, RNase free) | 1.5ml |
| — | 說明書 | 1份 |
| 產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
| R0635L-1 | T4 RNA Ligase 2, truncated (200U/μl) | 500μl |
| R0635L-2 | 10X T4 Rnl2, truncated Buffer | 1.5ml |
| R0635L-3 | PEG8000 (50%, RNase free) | 7.5ml |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
-20℃保存，至少一年有效。
注意事項：
本產品提供的試劑均用不含DNA酶和RNA酶的水配制，可直接用于3’端為羥基的單鏈RNA和5’端腺苷酰化的DNA或RNA之間的連接反應。
可根據具體應用選擇合適的操作方法，可能需準備額外的試劑，R0102 RNase inhibitor、R0022 DEPC水等。
使用本產品連接ssRNA和AppDNA時，建議使用的PEG8000的濃度為10%-30%，適當提高PEG8000的濃度，會顯著提高T4 Rnl2, truncated的催化的連接效率，而不改變其反應特性。
本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1.用于連接5’端腺苷?；⑶?’端不是羥基的(例如為氨基)單鏈DNA (AppDNA-NH2)和3’端為羥基的單鏈RNA (ssRNA)的使用說明具體如下。需要提前準備好待連接的樣品，以及Universal miRNA Cloning Linker (R0702, Beyotime)或自備的適當接頭。
2.參考下表在冰浴中配制如下反應體系：
| Reagent | Volume | Final Concentration |
| ssRNA | xμl | 0.5 or 1μM |
| DEPC-treated Water | (4-x-y)μl | - |
| Universal miRNA Cloning Linker (R0702, Beyotime) | yμl | 1 or 0.5, or 2 or 1μM |
| PEG8000 (50%, RNase Free) | 12μl | 0.3 |
| 10X T4 Rnl2, truncated Buffer | 2μl | 1 X |
| RNase Inhibitor (40U/μl) | 1μl | 2U/μl |
| T4 RNA Ligase2, truncated (200U/μl) | 1μl | 10U/μl |
| Total Volume | 20μl | - |
注意：
a.由于涉及RNA操作，需要嚴格按照RNA操作的規范進行，避免RNase污染，相關試劑和耗材需要經過DEPC處理去除RNase或者確保是RNase free的。推薦在連接體系中添加RNase Inhibitor，以避免ssRNA或其連接產物的降解，盡管經測試我們發現在嚴格操作的情況下，不加RNase Inhibitor也不會導致ssRNA或其連接產物發生明顯降解。
b.進行連接反應時，如果樣品RNA比較珍貴，希望充分被連接，可以按照接頭和樣品RNA的摩爾比為2:1的比例進行連接；如果樣品RNA比較充裕，同時感覺接頭的成本偏高時，可以按照接頭和樣品RNA的摩爾比摩爾比1:1甚至1:2的比例進行連接反應，這樣可以很好地節省接頭。ssRNA的用量可以根據實際的樣品量進行適當調節，相應的接頭的用量也按照比例進行適當調整即可。
c.如果同時進行多個連接反應，可以把上表中除ssRNA之外的所有溶液和酶提前預混合，然后再分裝到各反應管內。
3.連接反應：25℃, 孵育60min。為了使連接反應更加充分，可以適當延長連接反應時間。
4. 終止反應：65℃，孵育20min。?