?產品簡介
本產品結合了飽和染料抗體酶的優點，是一款適用于高分辨率熔解曲線（High Resolution Melting，HRM）分析的專業試劑盒。本品是一種2× PreMix，PCR反應液配制十分簡單方便；具有分辨率高和模板高度適應性等特點。
與SYBR Green不同，高濃度情況下不會抑制PCR反應；可以使雙鏈PCR產物的結合量達到飽和狀態，所以稱為“飽和染料”。不會產生SYBR Green?的“染料重排”現象，能夠很好的區分擴增產物之間單個堿基的差異。
本產品可用于已知SNP分析，以及未知突變基因掃描和甲基化PCR分析等研究。
試劑盒特點
1. HRM Analysis PreMix采用了抗體修飾的熱啟動DNA聚合酶，配合精心優化Buffer體系，具有高擴增效率，高擴增特異性和寬廣的可信范圍的特點。
2. HRM Mix中預混有Eva Green飽和染料，其在飽和狀態下具很高的熔解曲線分辨率，可以區分單個堿基的變異。
3.?該產品獨特的Buffer體系進一步增加了熔解曲線的穩定性，提高擴增的特異性。
4.?本產品附帶ROX Reference Dye，用于消除信號本底以及校正孔與孔之間產生的熒光信號誤差，方便客戶針對不同型號熒光定量PCR儀時選擇對應濃度使用。
儲存條件
收到本產品后，?請立即置于-20?℃?避光保存。從-20?℃?取出使用時，?將凍存的2x HRM Analysis PreMix和50×ROX Reference Dye溶解，然后輕輕顛倒混勻，待溶液完全均一后再行使用。如解凍后沒有使用，須徹底混勻后重新冷凍(在解凍過程中鹽會出現分層現象，未混勻進行冷凍，鹽晶體的析出將會對酶造成損害)。如需一段時間內經常取用，可在2～8℃條件下儲存3個月。避免反復多次凍融。
注意事項
1．本產品中含有熒光染料，保存本產品或配制PCR反應液時應避免強光照射。
2．如果試劑沒有混勻，其反應性能會有所下降。使用時請上下顛倒輕輕混勻，請不要使用振蕩器進行混勻，盡量避免出現泡沫，并經瞬時離心后使用。
3．引物純度對反應特異性影響很大，建議使用PAGE級別以上純化的引物。
4．20 μl反應體系中，基因組DNA模板的使用量一般小于100 ng，并盡量保持不同反應之間有相同的模?量。模板純度，OD260/280?1.6~2.0，OD260/230?1.5~2.0。
5．由于HRM具有很高的靈敏性，因此在條件允許的情況下推薦使用50 ul反應體系，大的反應體系可以提高反應重復性，減少實驗誤差對熔解曲線的負面影響。
6．引物設計：較短的PCR產物可以提高HRM的分辨率；因此在設計PCR引物時，遵循普遍的原則外，盡量保持產物長度在80~120之間。SNP位點盡量處在PCR產物序列中間位置。