大鼠(IL-17)elisa試劑盒中白介素17的檢測實驗
大鼠白介素17（IL-17）elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1.? 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.? 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3.? 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.? 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5.? 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗步驟
1.? 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.? 設置標準品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.? 待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；
4.? 隨后標準品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體50μL，，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.? 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.? 所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.? 所有孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判定：
?繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。
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大鼠(IL-17)elisa試劑盒中白介素17的檢測實驗
作者：北京雅安達生物技術有限公司 2014-08-29T00:00 (訪問量:6000)
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