1.?含可見光和熒光染料，既可以用金屬浴和水浴擴增用可見光肉眼判斷結果，也可用熒光 PCR?儀進行實時熒光檢測。
2.?內含的 dUTP-UNG?可防交叉污染。
3.?特異性比 RT-PCR?高，因為 RT-LAMP?擴增使用 4-6?條引物而不是兩條。
4.?靈敏性可達 10?拷貝/反應以下（隨引物而不同），故假陰性率更低。
只可用于科研，只可進行定性檢測，不能用于定量檢測
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成 份 |
編號 |
塑料盒包裝 |
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MMLV?逆轉錄酶（含?RI），200U/μL |
60905a |
50?μL（黃蓋） |
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4×RT?Buffer（含 dNTP） |
60905b |
250?μL（白蓋） |
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5×熒光及可視化LAMP?MagicMix |
200603a |
200?μL（綠蓋） |
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Bst?DNA?聚合酶 2.0（8U/uL） |
200403 |
50?uL?(紅蓋) |
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RT-LAMP?陽性對照模板-引物混合物 |
130923a |
20?μL（黃蓋） |
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超純水 |
100935 |
1mL（亮黃蓋） |
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使用手冊 |
200603sc |
1 份 |
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運輸及保存 |
低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。 |
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自備試劑 |
RT-LAMP?模板及?RT-LAMP?引物、PCR?級石蠟油（僅對使用金屬浴或水浴者）。 |
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準備工作：如果使用水浴鍋或金屬浴，需要在實驗啟動前打開并調到 60-65℃。如果用金屬浴，還必須在孔中加水以填充金屬孔和反應管間的空隙。金屬浴和水浴溫控遠遠不如PCR 儀器，所以使用前需要用陽性對照和陰性對照（水）做預實驗確認可用。一、樣品 RNA 的制備
1.?用自選方法純化樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數 RNA?提取試劑盒兼容。
如果有 N?個樣品，則至少需要做 N+2?個樣品制備，包括一個制備陽性對照（制備時加入自備的跟要檢測的靶分子相同的陽性對照模板，一起經歷提取過程）和一個制備陰性對照（用水替代樣品）。最后 N+2?個樣品一起進行 RNA?提取操作，得到 N+2?個 RNA?樣品
二、合成 1st-strand cDNA
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按下表配制 RT?反應體系:
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成分 |
加入量 |
?
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自備 RNA?模板總 RNA 或?poly(A)?mRNA 或專一的 RNA 注意：RNA?樣品不能有基因組 DNA?污染。 |
? 100-500?ng 10-500?ng 0.01pg-500ng |
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自備引物 F3 |
1 μL |
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4×RT?Buffer（含 dNTP） |
5 μL |
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自備?RNase-free?水 |
補水到?19?μL |
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4.?70℃保溫 5?分鐘后立即冰浴。
5.?37℃保溫 5?分鐘。對富含二級結構的高 GC?RNA?模板，可改成 45℃保溫 5?分鐘。
6.?加入?1μL?(=200?U)?MMLV?逆轉錄酶（含?
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