特異性小鼠血清中瘦素放射免疫分析的建立和應用-技術前沿-資訊-生物在線

特異性小鼠血清中瘦素放射免疫分析的建立和應用

作者:北京經緯博恒生物科技開發有限責任公司 2008-11-13T00:00 (訪問量:43455)

   建立高特異性和高靈敏度的小鼠血清瘦素(Leptin) 放射免疫分析方法,用于測定小鼠血清中瘦素水平。用國外Peprotech公司進口的人工重組的小鼠leptin 多次免疫兔子獲取高效價、高特異的小鼠leptin 抗體。用氯氨T 法制備125 I 標記的leptin , 經Sep2hadex G225 純化。抗原抗體反應采用平衡一步法, 4 ℃培養24 h 后經PR 試劑分離結合和游離的標記抗原。該法測定范圍為1. 1~300 ng/mL , 最低檢出值為0. 5 ng/mL ,批內和批間誤差小于4. 4 %和6. 7 %。

   用該法測定正常小鼠23 例,血清leptin為(39. 65 ±15. 72) ng/mL ,而人leptin 放射免疫法為(1. 56 ±0. 45) ng/mL ,具有顯著的差異,2 組數據有中等程度的相關性( r = 0. 621 8) 。用該法測定正常人樣本30 例,血清leptin 為(19. 46 ±7. 09) ngPmL ,而人leptin 放射免疫法為(10. 08 ±5. 20 ) ng/mL ,具有顯著差異,但不存在明顯的相關性( r = - 0. 095 9) 。

  ? 用該法發現燙傷大鼠血清leptin 明顯下降(14. 33 ±3. 52) ng/mL 與(6. 71 ±3. 14) ng/mL ,燙傷大鼠切痂后leptin 于96 h 內恢復正常水平(12. 08 ±4. 05) ngPmL。該法穩定、簡便、特異、靈敏,適于檢出小鼠和大鼠血清中的leptin 水平, 而不適合于檢測人血清內leptin 水平。

????? 本公司開發的鼠類LEPTIN方法,可以提供動物樣品血清樣品檢測服務,每樣品檢測費30元人民幣!

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