貨號:BC0170
規格:50T/24S
產品內容:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體15 mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存,用時加27mL蒸餾水配制成懸濁液,使用前充分搖勻;
試劑三:液體160μL×1支,4℃保存;
試劑四:液體11mL×1瓶,4℃保存。
試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
產品說明:
SOD(EC 1.15.1.1)是一種廣泛存在于生物體內的金屬酶,是重要的氧自由基清除劑,能催化超氧化物陰離子發生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系統中具有重要作用。
通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-),O2-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜,后者在560nm處有吸收;SOD可清除O2-,從而抑制了甲臜的形成;反應液藍色越深,說明SOD活性愈低,反之活性越高。
操作步驟:
一、樣品的前處理:???
1.?細菌或培養細胞:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500-1000:1 的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2.?組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5-10 的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿;8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.?血清(漿)樣品:直接檢測。
二、測定步驟:
1.?分光光度計預熱30min以上,調節波長至560nm,蒸餾水調零。
2.?測定前將試劑一、二和四37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴5min以上。
3.?樣本測定(在EP管中加入下列試劑)
4.?
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 | 空白管1 | 空白管2 |
試劑一(μL) | 240 | 240 | 240 | 240 |
試劑二(μL) | 510 | 510 | 510 | 510 |
試劑四(μL) | 180 | 180 | 180 | 180 |
樣?品?(μL) | 90 | 90 | ? | ? |
蒸餾水(μL) 地 址: 北京市北京經濟技術開發區環科中路16號26幢3層301 聯系人: 索萊寶-龔思雨 電 話: 010-50973130 傳 真: Email:3193328036@qq.com
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