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細胞培養板的選擇
?
細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U?型和V?型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536?孔等;根據材質的不同有Terasaki?板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。
(1)平底和圓底(U?型和V?型)培養板的區別和選擇?
不同形狀的培養板有不同用途。培養細胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致。因此做MTT?等實驗時,無論是貼壁和懸浮細胞,一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養板。要特別注意材質,標示“Tissue?Culture?(TC)?Treated”是養細胞用的。?U?型或V?型板,一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面,當做兩種不同淋巴細胞混合培養時,需要二者相互接觸刺激,這時一般會選用U?型板,因為細胞會由于重力的作用而聚集在很小的范圍內內。圓底培養板還會用于同位素摻入的實驗,需要用細胞收集儀收集細胞的培養,如“混合淋巴細胞培養”等。V型板常用做細胞殺傷、免疫學血凝集實驗。細胞殺傷這種實驗也可用U?型板替代(加入細胞后,低速離心)。?
(2)Terasaki?板和普通細胞培養板的區別
Terasaki?plate主要是用于晶體學研究,產品設計便于對晶體的觀察與結構分析。材料上選擇crystal?class?polymer?,特殊的材料有利觀察晶體結構。細胞培養板主要是PS?材料,材料是treated?sufface,便于細胞貼壁生長與伸展。當然還有浮游細胞的生長材料,同時還有low?binding?surface????
(3)細胞培養板與酶標板的區別?
酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不用做細胞培養,它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測,需要更高的要求和特定的酶標工作液。
(4?)常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量?
不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在2~3mm?范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量(參考下表)。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。
|
培養器皿 |
底面積(cm2) |
加培養液量(mL) |
可獲細胞量 |
|
96?孔培養板 |
0.32 |
0.1 |
105 |
|
48?孔培養板 |
0.8 |
0.5ml |
2.5×105 |
|
24?孔培養板 |
2 |
1.0 |
5×105 |
|
12?孔培養板 |
4.5 |
2.0 |
106 |
|
6?孔培養板 |
9.6 |
2.5 |
2.5×106 |
|
4?孔培養板 |
28 |
5.0 |
7×106 |
|
3.5cm?培養皿 |
8 |
3.0 |
2.0×106 |
|
6cm?培養皿 |
21 |
5.0 |
5.2×106 |
|
9cm?培養皿 |
49 |
10.0 |
12.2×106 |
|
10cm?培養皿 |
55 |
10.0 |
13.7×106 |
|
25cm?塑料培養瓶 |
25 |
5.0 |
5.2×106 |
|
75cm?塑料培養瓶 |
75 |
15~30 |
2×107 |
|
25cm?玻璃培養瓶 |
19 |
4.0 |
3×106 |
|
100cm?
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