產品簡介
本產品是一種高效、穩定、快速并可以去除基因組DNA 污染的反轉錄預混Mix。5× FastKing-RT SuperMix 中不但含有RTPCR中反轉錄反應所需的所有試劑，還含有高效去除基因組DNA 的熱敏gDNase。FastKing RT Enzyme 是通過分子改造后的新型反轉錄酶，在通讀GC 含量高，二級結構復雜的RNA 模板和抗逆性等方面的表現突出；熱敏的gDNase 生效快，效率高，作用時間短，在處理殘留基因組DNA 之后不會對cDNA 造成影響。二者結合使用，可使殘留基因組的去除與反轉錄反應同時進行，極大方便了反轉錄操作。
產品特點
■ 快速：僅需加入模板，18 分鐘一步法完成去基因組和高效反轉錄
■ 高效：修飾了疏水motif，反轉效率超過95%
■ 靈敏：低至1 ng 的模板也能被準確識別
■ 簡潔：采用熱敏DNase，見效快，效率高，時間短，不會對cDNA 產生影響
下游應用
反轉錄后的cDNA 可用于常規PCR，熒光定量PCR，cDNA 文庫構建，
SAGE（基因表達連續分析），引物延伸等多種常規實驗。
適用范圍
RT-PCR；熒光定量RT-PCR；cDNA文庫構建；SAGE(基因表達連續分析)；引物延伸。
實驗例
實驗例 1. 分別使用 TIANGEN KR118、國外 A 公司和國內 B 公司的一步法反轉定量試劑合成cDNA，使用 TIANGEN FP209檢測小鼠 RN5 基因，展示擴增曲線、熔解曲線和標準曲線。結果顯示，TIANGEN KR118 反轉錄得到的 cDNA 量大，擴增 Ct靠前，特異性高，梯度優秀，特別對于低豐度模板的檢測優于其他競爭試劑。
實驗例 2. 分別使用 TIANGEN KR118、國外 A 公司和國內 B 公司的一步法反轉定量試劑合成 cDNA，使用 TIANGEN FP209 檢測人類 HsG 基因，并且人為添加不同濃度的基因組 DNA，檢測不同試劑對基因組 DNA 的去除能力。Ct 結果顯示，TIANGEN KR118 具有優秀的基因組 DNA 去除能力，多至 500 ng 的基因組 DNA 殘留也能有效去除，不會對結果造成影響。ND：未檢出。NRT：不做反轉錄，直接用混合物定量檢測。