DAB顯色試劑盒(20×)-分析方法-資訊-生物在線

DAB顯色試劑盒(20×)

作者:北京索萊寶科技有限公司 2019-09-17T00:00 (訪問量:4147)

DAB顯色試劑盒(20×)?

品牌:Solarbio | 貨號:DA1010

英文名稱DAB Substrate kit,20×
儲存條件-20℃,避光,有效期1年。避免反復凍融。
單位

產品簡介:

二氨基聯苯胺(Diaminobenzidine,DAB)是過氧化物酶(POD)的底物,DAB 顯色液主要用于免疫過氧化 物酶法,適用于辣根過氧化物酶 HRP 標記的免疫印記或免疫組化反應。過氧化物酶使底物發生反應,于反應部 位產生棕色沉淀物。免疫印記可直接在膜上顯示條帶。免疫組化標本顯色時間一般為室溫 5-20 分鐘,隨后在顯 微鏡下觀察顯**況,顯色充分后應將標本及時脫水封固。其終產物可直接在光鏡下觀察,也可經 OsO4 處理 后,增加反應產物的電子密度,用于電鏡觀察。?

操作說明:?

1. 對于組織切片或蛋白質印記膜,在與辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適 當洗滌液洗滌 3-5 次,每次 3-5 分鐘。?

2. 取 900ul PBS(或雙蒸水),加入 50ul 溶液 A,50ul 溶液 B 混合均勻,即配成 DAB 工作液。 如需要更大體積工作液,可按比例放大。此溶液必須現用現配,配好后避光保存,1 小時內使用,過期后請 將剩余的液體廢棄。?

3. 向組織切片或膜上加入適量 DAB 工作液,確保能充分覆蓋樣品。?

4. 室溫避光孵育 3-10 分鐘或更長時間,避免光照,直至顯色至預期深淺。?

5. 去除 DAB 染色工作液,用蒸餾水洗滌 2-3 次即可終止顯色反應。?

6. 對于組織切片或細胞樣品,顯色反應終止后,可對其進行其他染料復染。對于膜,顯色反應終止后,可以 室溫晾干避光保存。

?注意事項:?

1.DAB 溶液應低溫密封保存。如有結晶析出,應確保結晶完全溶解再行使用;?

2.顯色工作液應現用現配,新鮮配制的工作液應為無色或淺棕色,如顏色過深,請勿使用;?

3.顯色時間嚴格控制,根據情況調整,以免顯色過度。固相膜顯色數小時后即會褪色,不能永久存在;?

4.DAB 為可疑致癌物,請采取必要的防范措施。操作時應戴手套,盡量避免與皮膚接觸,用后及時徹底沖洗, 接觸 DAB 的實驗用品經洗液浸泡 24h 后使用。


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