應用親和素和生物素的ELISA試劑盒，親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個生物素分子親密結合。現在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素。生物素又稱維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物，生物素-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素醫學教育網整理化的產物。親和素與生物素的結合，雖不屬免疫反應，但特異性強，親和力大，兩者一經結合就極為穩定。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置，可以連接更多的生物素化的分子，形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELISA試劑盒偶聯起來，就可大大提高ELISA試劑盒的敏感度。
親和素-生物素系統在ELISA試劑盒中的應用有多種形式，可用于間接包被，亦可用于終反應放大?？梢栽诠滔嗌舷阮A包被親和素，原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結合，通過親和素-生物素反應而使生物素化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量，而且使其結合點充分暴露。另外，在常規ELISA試劑盒中的酶標抗體也可用生物素化的抗體替代，然后連接親和素-酶結合物，以放大反應信號。
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