在免疫酶技術中，抗原、抗體、酶及酶標記抗體（或抗原）在分離與純化過程中，常常會碰到去鹽這一實驗環節。經過去鹽，蛋白質溶液中不必要的無機鹽分子得以去除，從而使蛋白進一步純化與穩定。常用的去鹽技術如下：

1．透析

適用于體積不太大的蛋白質溶液，簡單方便，效果理想但費時。

2.凝膠過濾

適用于體積中等的蛋白質溶液，簡便快速，效果理想，但去鹽后的蛋白質溶液體積增大較多。

3.超濾

適用于體積較大的蛋白質溶液，去鹽速度快，同時具有濃縮作用，但由于膜吸附作用，樣品丟失較多。

4.透析

實驗室常用的去鹽方法是透析法。

在透析法中所使用的透析袋，是一種斗透膜。半透膜具有使小分子或離子透過，而蛋白質分子不能通過的特性。將蛋白質溶液裝入透析袋內，浸泡于蒸餾水中，由于膜內外可擴散離子濃度的差別，使蛋白質溶液中的無機鹽分子向膜外蒸餾水中擴散。如果經常更換蒸餾水，則可將蛋白質溶液中的鹽類分子全部除去，這就是半透膜的去鹽透析原理。假若膜外不是蒸餾水而是緩沖液，可以經過膜內外離子的相互擴散，改變蛋白質溶液的無機鹽成分，這就是半透膜的平衡透析原理。在離子交換層析前經常進行平衡透析處理。

半透膜透析去鹽過程如下：

（1） 依據樣品量的多少，剪取一段半透膜，浸在蒸餾水中一段時間，然后再用蒸餾水沖洗。

（2） 使用時，將半透膜一端折疊，封閉使之成底端，并用滴管加入蒸餾水檢查是否漏水。

（3） 在1000－2000ml大燒杯中注滿水，燒杯口上擱置一玻棒。

（4） 倒盡膜內蒸餾水，然后加入蛋白質樣品液（不能裝得太滿，以免脹裂），用橡皮筋扎牢管的上端，懸掛在玻璃棒中央，放入蒸餾水燒杯中。

（5） 將蒸餾水燒杯置于4℃冰箱中透析2－3天，每天換水3次以上。如果置于磁力攪拌器上攪拌透析，則去鹽效果更好。要經常檢查透析袋的扎口是否緊密，以防漏液。

（6） 按不同樣品要求去除不同無機鹽離子，可用特定的指示劑測定最后透析用過的蒸餾水中是否還含有這種離子。

5．討論

（1）蛋白質樣品的濃度應透析后測定，因為經過半透膜透析，膜內滲透壓高于膜外，水分子會進入膜內，所以在去鹽以后，蛋白質溶液體積會相應增大。

（2）有時會在透析袋內發生沉淀，一般而言，通過離心去除并不影響蛋白質樣品的性質。

（3）透析袋在生理鹽水中浸洗后，還可繼續使用。

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