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干貨 | 如何正確選擇細胞培養“板瓶皿”的使用?

作者:無錫耐思生命科技股份有限公司 2024-01-24T00:00 (訪問量:47388)

培養細胞時,何時使用培養瓶,何時使用孔板培養,取決于實驗目的和需要。一般情況下,原代細胞培養和常規傳代培養使用培養瓶,可獲得大量實驗用細胞。
                

                  細胞培養瓶 

由高品質聚苯乙烯(PS)材料,以超精密模具及全自動化生產工藝生產,產品應用于實驗室細胞培養,優異的光學性質便于顯微觀察,表面經過TC處理,細胞貼壁效果更佳。
                                                                                                                   

TIPS:什么是TC處理?

TC處理表示該器皿經過表面的改性處理,適合貼壁細胞的培養。而懸浮生長的細胞,就不一定需要這樣經過特殊處理過的器皿。但經過表面的改性處理后的細胞培養皿等一般也適合懸浮細胞的培養。

大部分動物細胞需要貼附在一個固相界面上才能生長。而只有親水的固相界面,細胞才能貼附。

最早的細胞培養器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是親水的,不經過特殊的處理,普通的細胞就可以貼附生長。而聚苯乙烯透光性能好,具有較好的強度和易塑性,并且沒有毒性,成為一次性細胞培養皿和細胞培養板等一次性細胞培養耗材的首選材料,然而聚苯乙烯表面是疏水的,所以需要經過表面的改性處理,增強細胞吸附與蛋白結合的能力,變成親水后才能適用于細胞培養。
                                                                                                                   

首先,根據期望獲得的細胞產量來選擇,培養瓶是通過表面積來命名的,例如T25、T75、T175,數字就是表面積,25就是25平方厘米,如此類推;
其次,根據實驗操作熟練程度來選擇,不管是換液、傳代、還是收獲細胞,培養皿的操作比較方便,但因為其開口很大,所以容易污染,如果你是新手,不建議直接用培養皿養細胞。

                                                       
                                                      細胞培養皿 

最后,如果選擇培養瓶培養,還應該盡量選擇有斜肩設計、帶透氣孔瓶蓋的型號。
前者可以避免培養瓶平放后,過多的培養基接觸瓶蓋造成污染,后者可以保持內外的二氧化碳濃度一致。
如果瓶蓋不透氣,那在放進培養箱時,應擰松一圈,以便內外氣體能順利交換。

2 、以細胞為載體或對象的實驗使用細胞培養板較好,如藥敏試驗、MTT(96孔培養板)、免疫組化(6孔培養板)等。


                                                           細胞培養板 


選擇好合適的孔板后,在培養階段,有2點注意事項:

  • 多孔板會帶板蓋,但其密封性不好,在培養箱內會造成邊緣的孔位蒸發效率過高,進而影響細胞生長速率。可以在蓋上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜?;蛘呱釛夁吘壙孜?,并采用添加培養基來代替。
                                                                                                               

    NEST EDGE細胞培養板

    EDGE細胞培養板周圍具有溝槽設計,通過改變原有96孔板的結構,在最外側孔的外側設計了不同寬度及厚度的槽形結構,因此達到最大程度消除邊緣效應的目的,同時又保證了細胞培養的最佳狀態。提高了培養板的溫度穩定性和均衡的濕度環境,從而減 少或消除了邊緣效應,保證了細胞生長的均一性。

                                     
                                                                                                               

  • 當細胞種入孔內以后,不應該再進行過多的震動,例如晃動、抖動培養板,而應該輕緩的放入培養箱中。

  • 如果培養箱由多人共用,還應該考慮頻繁開關箱門、拿放孔板造成的震動,這些不利因素都應該盡量減少。

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