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人S100B蛋白(S-100B) ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)

作者:北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司 2014-12-29T00:00 (訪問(wèn)量:9670)

人S100B蛋白(S-100B) ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)
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● ? 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
● ? 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
● ? 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
● ? 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
● ? 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
● ? 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
● ? 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
● ? 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
(S-100B) ELISA檢測(cè)試劑盒

試驗(yàn)原理:

? ? ? ? S-100B試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知S-100B濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將S-100B和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中S-100B的濃度呈比例關(guān)系。
?(S-100B) ELISA檢測(cè)試劑盒
試劑盒內(nèi)容及其配制:
試劑盒成份96孔配置48孔配置
96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)
塑料膜板蓋1塊半塊
標(biāo)準(zhǔn)品:200ng/ml ? 1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)
空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)
生物素標(biāo)記的抗S-100B抗體1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)
親和鏈酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(5ml)
洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)
底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)
底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)
終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)

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自備材料:
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
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安全性:
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1. ? 避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. ? 實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. ? 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

(S-100B) ELISA檢測(cè)試劑盒
樣品收集、處理及保存方法:
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1、血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原
和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅
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細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
?5、 保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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