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鈣黃綠素是一種激發光波長在495nm處,發射光波長在515nm處的鈣離子熒光指示劑。,因為它的細胞毒性很低,所以鈣黃綠素常作為熒光探針去染活細胞的。
鈣黃綠素溶液配制
稱取0.2g射香草酚酞,1g鈣黃綠素及100g氯化鉀在玻璃研缽中研細混勻。
鈣黃綠素溶液染色原理
鈣黃綠素在其濃度大于100 mM時,鈣黃綠色熒光自我淬滅。它常被用做絡合物指示劑,用來滴定EDTA螯合的鈣離子,并且用熒光檢測法測定鈣離子濃度。它具有非常好的水溶性,其質子 解離常數(酸度系數)pKa1=2。1, pKa2=2。9, pKa3=4。2, pKa4=5。5, pKa5=10。8和pKa6=11。7。Calcein-AM是一種可對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑,Calcein-AM由于在 Calcein(鈣黃綠素)的基礎上加強了疏水性,因此能夠輕易穿透活細胞膜。當其進入到細胞質后,酯酶會將其水解為Calcein(鈣黃綠素)留在細胞 內,發出強綠色熒光。
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