經過三次0.1μm無菌過濾器過濾除菌,pH值、滲透壓、血紅蛋白濃度、總蛋白、總IgG、內毒素、促進生長等多項指標檢測合格,無細菌、支原體、生物化學污染,具有高質量和穩定性,適用于嬌貴細胞培養。
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使用注意事項
Q:胎牛血清的試用范圍?
適用于一般細胞,腫瘤細胞,部分干細胞等。
Q:如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?
血清解凍時應將血清從-15~-70℃的低溫冰箱中取出放入4℃冰箱解凍1天,待全部解凍后再分裝。解凍過程中請不時搖勻(小心勿造成氣泡),使血清成分和溫度均勻,從而減少沉淀的產生。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍,并避免反復凍融。需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - -70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞,而影響血清質量。
Q:有時在血清中見到的絮狀沉淀可能是些什么物質?
主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量,可用400 xg離心5 min去除,也可不用處理。
Q:如何避免血清中產生沉淀?
(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
(2) 血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
Q:在使用前是否需要對血清進行過濾?
一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。
Q:自然溶化好的胎牛血清放在室溫下一晚還能用嗎?
室溫不可以,建議4℃保存。
如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:
(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;
(2)血清質量不好,反復凍融的結果;
(3)配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;
(4)配制培養基的水質、容器不合格??蓱秒x心、過濾的方法去除這些黑點;
(5)培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。
Q:細胞培養中如何防止黑點生成?
(2) 培養基無需37℃水浴。
(3) 培養基保持最佳PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴格控制配制培養基的水質,容器定期刷洗。
(5) 掌握細胞傳代的最佳時機,細胞切勿生長過老。
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