經(jīng)過三次0.1μm無菌過濾器過濾除菌,pH值、滲透壓、血紅蛋白濃度、總蛋白、總IgG、內(nèi)毒素、促進(jìn)生長(zhǎng)等多項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)合格,無細(xì)菌、支原體、生物化學(xué)污染,具有高質(zhì)量和穩(wěn)定性,適用于嬌貴細(xì)胞培養(yǎng)。
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使用注意事項(xiàng)
Q:胎牛血清的試用范圍?
適用于一般細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞,部分干細(xì)胞等。
Q:如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
血清解凍時(shí)應(yīng)將血清從-15~-70℃的低溫冰箱中取出放入4℃冰箱解凍1天,待全部解凍后再分裝。解凍過程中請(qǐng)不時(shí)搖勻(小心勿造成氣泡),使血清成分和溫度均勻,從而減少沉淀的產(chǎn)生。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,并避免反復(fù)凍融。需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - -70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)被破壞,而影響血清質(zhì)量。
Q:有時(shí)在血清中見到的絮狀沉淀可能是些什么物質(zhì)?
主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量,可用400 xg離心5 min去除,也可不用處理。
Q:如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(2) 血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
Q:在使用前是否需要對(duì)血清進(jìn)行過濾?
一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
Q:自然溶化好的胎牛血清放在室溫下一晚還能用嗎?
室溫不可以,建議4℃保存。
如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過老,破碎的細(xì)胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);
(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
Q:細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?
(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。
(3) 培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。
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