真空冷凍干燥技術簡稱凍干技術,是生物及其它領域用來提取純化和保存樣品的常見應用方法之一,本文將列舉一些常見物質的共晶點溫度及其凍干方式,與大家共同探討。
眾所周知,在凍干過程中最關鍵的條件就是控制樣品溫度保持在共晶點溫度以下10-15℃,從而保證樣品不熔化,維持微孔結構和理化性質保持完好不變?,F將一些常見樣品的共晶點溫度數據和凍干方式整理出來,供大家參考。
表一 常見物質共晶點溫度:
|
物質 |
共晶點溫度℃ |
物質 |
共晶點溫度℃ |
|
藻類 |
-15~-25 |
書籍考古文物 |
0~3 |
|
細菌、病毒、真菌、疫苗 |
-40或更低 |
植物、魚類 |
-15 |
|
膠原 |
-35 |
組織樣品 |
-56 |
|
食品:水果、蔬菜、肉類 |
-25 |
蜂王漿、蜂蜜 |
-40 |
|
陶瓷粉 |
-10 |
污泥 |
-25 |
|
蛋白質、酶、血液制品 |
-13~-40 |
奶粉 |
-13(牛奶) |
|
核酸和多肽 |
-30 |
有機溶劑制品 |
低于-50 |
|
蔬菜材料 |
-10(某些-30) |
聚合物材料如醫療用材料 |
-2~-30 |
|
尿樣、糞便等需做殘留分析 |
-30 |
以水為主含有少量有機溶劑或鹽類 |
-2~-30 |
由上表可見,大多數樣品的共晶點溫度都在-40以上,這是為什么絕大多數凍干機生產廠商均有冷阱溫度在-50 ~ -55℃之間機型的原因,用這個區段的冷阱溫度足以滿足大多實驗樣品的凍干實驗要求。表二羅列的是一些常見樣品凍干方式的推薦方式,包括預凍溫度、凍干時系統應該維持的真空度值、凍干的方式Process A還是Process B、凍干容器的選擇、凍干機的功能要求等。
表二 常見樣品凍干方式推薦:
|
樣品 |
預凍溫度℃ |
共晶點溫度℃ |
真空度mbar |
主凍干時間h |
|
細菌、病毒、真菌、疫苗 |
-40或更低 |
-30~-35(或更低) |
0.12或更低 |
24-48 |
|
凍干方式A/B |
凍干容器 |
凍干機功能 |
凍干過程設計 |
|
|
A/B |
安瓿瓶、樣品盤等 |
如可控制真空度、擱板可控溫等 |
-40℃/5h,每5個h提升5℃(3~4次),然后間隔時間減至每3h,每1.5h。 |
|
|
樣品 |
預凍溫度℃ |
共晶點溫度℃ |
真空度mbar |
主凍干時間h |
|
蛋白質、酶、血液制品 |
建議旋動機旋凍 |
-13~-40 |
0.77~0.07 |
1cm厚度24 |
|
凍干方式A/B |
凍干容器 |
凍干機功能 |
凍干過程設計 |
|
|
A/B |
5-500ml的容器如圓底燒瓶、凍干瓶,樣品盤 |
如可控制真空度、擱板可控溫等 |
-30℃/5h,每5h升溫5℃(3次),減至每2h間隔 |
|
|
樣品 |
預凍溫度℃ |
共晶點溫度℃ |
真空度mbar |
主凍干時間h |
|
核酸和多肽 |
|
-30 |
0.12 |
24~36 |
|
凍干方式A/B |
凍干容器 |
凍干機功能 |
凍干過程設計 |
|
|
A/B |
核酸:微量管 多肽:樣品盤、凍干瓶、安瓿瓶等 |
如可控制真空度、擱板可控溫等 |
-30℃/5h,每5小時升溫5℃(5~6次),減至每2h間隔 |
|
|
樣品 |
預凍溫度℃ |
共晶點溫度℃ |
真空度mbar |
主凍干時間h |
|
有機溶劑制品 |
低于-50 |
不確定 |
依據共晶點溫度 |
不確定 |
|
凍干方式A/B |
凍干容器 |
凍干機功能 |
凍干過程設計 |
|
|
A |
依據樣品而定 |
防腐蝕設計、真空度可控、擱板溫度可控等 |
防止局部融化溫度依據共晶點審慎設計 |
|
|
樣品 |
預凍溫度℃ |
共晶點溫度℃ |
真空度mbar |
主凍干時間h |
|
植物 |
-10℃(特殊物種-40℃)超低溫冰箱或者LN2 |
-15(特殊物種-30) |
1.03~0.12 |
36 |
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凍干方式A/B |
凍干容器 |
凍干機功能 |
凍干過程設計 |
|
|
A/B |
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