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細胞治療:
1、?細胞因子誘導的殺傷細胞(cytokine-induced killer cell, CIK)
(1). 1991年發現的,以共同表達CD3和CD56為特征;
(2)增值速度快:經過2 -3周左右的體外培養,細胞數量可增加400倍以上, 占總細胞的比例可達40%以上
(3)殺瘤活性高:殺傷單位(TLU)為LAK細胞的73倍以上。
(4)殺瘤譜廣:CIK細胞雖然以CD3、CD56細胞為主要效應細胞,卻沒有T淋巴細胞殺傷時的MHC限制性。
(5)體外培養依賴CD3單抗和IFN-γ 。CD3單抗可作為絲裂原活性單位與T細胞表面的CD3交聯,誘導其活化,而IFN-γ則誘導IL-1等細胞因子的合成。
2、樹突狀細胞(dendritic cell,DC)是最有效的抗原遞呈細胞。DC的目標在于誘導腫瘤特異性和長期持久的免疫反應,這種效應有助于防止微小殘留病灶和腫瘤復發。
3、LAK/TIL/CD3AK/CTL :自上世紀80年代以來先后應用于臨床的字體免疫細胞,但由于存在著擴增倍速較低、細胞來源困難、細胞毒力不高等諸多問題,該療法在臨床應用上受到一定限制。
4、自體免疫細胞治療原理是從患者自體外周血中分離的單個核細胞經過體外激活和擴增后輸入患者體內,直接殺傷腫瘤細胞或病毒感染細胞,或調節和增強機體的免疫功能的一種新的腫瘤治療技術。
5、經基因改變的自體T細胞:自體T細胞體外經慢病毒轉染表達識別CD19的嵌合受體,該受體識別表達CD19的CLL腫瘤細胞后殺傷腫瘤細胞,這一基因改變的細胞在回輸后在體內增值1000倍以上。
適應情形
1) 減少惡性腫瘤傳統治療后的復發與轉移;
2) 提高腫瘤綜合治療療效;
3) 少數腫瘤及患者的主要治療手段對放化療不敏感或者無法耐受的情況以及對免疫原性較強的的腫瘤)。
毒副作用
1) 細胞制劑中的某些成分(如IL-2、IFN-7)或殘留可引起寒戰、發熱、肌痛等感冒癥狀或胃腸道反應,大部分癥狀輕微而且可以自行緩解,但仍需引起臨床足夠重視。
2) 大劑量靜脈輸入細胞可能造成細胞滯留某系臟器(如肺部),其影響有待進一步研究。
主要禁忌
1) DC/CIK不宜與化療放療同時應用以防化療放療殺傷輸入的細胞,CIK細胞對化療尤為敏感;
2) 對本治療中所用生物制劑(如IL-2IFN-7)過敏患者不宜使用免疫細胞治療。

DC/CIK在腫瘤治療中的典型應用
常見治療流程舉例?
? 誘導:患者采血前注射GM-CSF或IL2 3-5天?
? 采血: 使用血細胞分離機從循環血液中采集富含單核細胞的血樣(~109單核細胞)?
? 細胞分離:離心收獲單核細胞,用貼壁方法分離DC和CIK?
? 擴增與誘導:?
? 1) DC在擴增中使用因子誘導,之后負載抗原,用腫瘤抗原刺激提高DC對特定腫瘤細胞的識別能力。
? 2) CIK在擴增中使用因子誘導,之后可與DC共培養?
? 細胞質檢:對制備后的細胞做活性、標志物及常規微生物檢驗?
? 細胞回輸:將細胞洗滌并在懸浮液中添加白蛋白、IL2等因子,一個療程內分若干次回輸患者體內(DC:≈107-8/注射;CIK:≈108-9/注射)?
? 療效評估: 在每一個療程后按照療效指標,對患者的治療效果進行評估。
細胞治療中一些需要進一步完善的地方
? 細胞制備規范性:操作、設備耗材、試劑
? 操作:
? 不同個體來源的細胞混合培養
? 細胞傳代次數過多
? 細胞活性檢測僅使用臺盼藍而未進一步檢測凋亡
? 細胞生長密度過大
? 細胞凍存方法不規范
? 設備與耗材?
? 使用超凈臺培養病人細胞
? 細胞培養重復使用移液管、培養瓶、離心管等一次性耗材
? 凍存管液氮儲存的樣品交叉感染
? 培養病人細胞的培養箱不及時滅菌
? 試劑?
? 培養基體系尚未完善和標準化
? 無血清培養與血清替代品的選擇
? 血清選擇使用不夠嚴格
? 干細胞凍存過程中血清濃度過高
? 細胞臨床應用方案?
? 針對不同疾病和臟器的細胞移植方案的研究開發
? 對潛在不良反應的進一步防范
? 與其他療法的配伍
? 復蘇后的細胞不經培養立即注射?
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? 治療機理的進一步研究?
? 治療機理的深入研究
? 細胞制劑的開發
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