農桿菌感受態制備試劑盒(Agrobacterium Competent Cells Preparation Kit)，是一種專門用于農桿菌感受態快速制備的試劑盒。農桿菌經過本試劑盒處理后，細胞膜的通透性發生了暫時性的改變，成為能允許外源DNA分子進入的感受態細胞。

農桿菌常生活在植物根表面，依靠由根組織滲透出來的營養物質生存，是一類廣泛存在于土壤中的革蘭氏陰性細菌，常用于基因過表達、敲除、敲減和編輯等轉基因植物的構建。根瘤農桿菌Ti質粒上的T-DNA上有8個左右的基因在植物細胞內表達，指導合成一種特殊化合物冠癭堿，引起轉化細胞癌變;而發根農桿菌的Ri質粒同樣含有T-DNA,可誘導產生發狀根，其特征是大量增生高度分支的根系。

本試劑盒適用于絕大多數常見的農桿菌，如GV3101、EHA101、LBA4404和EHA105等根瘤農桿菌(Agrobacterium tumefaciens)或C58C1和Ar.1193等發根農桿菌(Agrobacterium rhizogenes)感受態細胞的制備。使用本試劑盒可以使感受態轉化效率達到10³-10⁴cfu/μg質粒。但是不同種類農桿菌菌種制備出來的感受態細胞，轉化效率可能有較大差異。此外，對于較小的質粒轉化效率會略高，而對于較大的質粒則轉化效率會略低一些。

本試劑盒操作簡單，細菌培養后僅需1個小時左右即可完成感受態細胞的制備。

本試劑盒提供了專門用于制備農桿菌感受態的培養液，使感受態的制備更加便捷。

農桿菌感受態制備試劑盒制備的農桿菌感受態轉化效果參考圖1。

圖1. 農桿菌感受態制備試劑盒制備的農桿菌感受態轉化效果圖。使用本試劑盒制備的感受態在液氮中速凍后保存在-80℃。取-80℃保存的農桿菌感受態放置于室溫片刻，待其部分融化，處于冰水混合狀態時插入冰浴中。每100 μl感受態細胞加入0.1μg質粒DNA，用手撥打管底混勻，依次于冰上靜置15min、液氮1-3min、37℃水浴3-5min。 然后在超凈臺中加入500 μl無抗生素的LB或YEB液體培養基，28℃振蕩培養2h。4000×g離心1min收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸農桿菌沉淀，涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28-30℃培養箱培養2-3天。GV3101轉化效果見圖1A(轉化效率約為3×10³ CFU/μg質粒)，LBA4404轉化效果見圖1B(轉化效率約為1.5×10³ CFU/μg質粒)，EHA101轉化效果見圖1C(1×10⁴ CFU/μg質粒)。本產品的實際使用效果會因具體實驗條件、實驗材料等的不同而存在差異，圖中效果僅供參考。

本試劑盒可以分多次使用，共可以制備足夠進行100次轉化的感受態細胞。

-20℃保存，一年有效。 利福平須避光保存。

本試劑盒中提供的利福平溶液如果出現沉淀，屬于正?，F象，可以在充分溶解后使用。

感受態制備的過程中須注意無菌操作，避免其它微生物的污染。

本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。